生物素-植物鞘氨醇N-Hexanoyl-biotin-phytosphingosine，Biotin-PHS 蛋白Pull-down探针

发布人：陕西星贝爱科生物科技有限责任公司

发布日期:2026/7/28 11:55:26

一、合成方法

C1 端选择性衍生：

路线逻辑：

选择性保护 C2-NH₂、C3-OH、C4-OH（异亚丙基 / 乙酰基正交保护）；

游离C1 伯羟基烷基化，引入末端氨基 Linker；

脱保护，完整释放 C2-NH₂、C3-OH、C4-OH；

末端氨基与Biotin-LC-NHS / Biotin-PEG4-NHS酰胺偶联。

优势：

完整保留全部天然极性官能团（氨基 + 三个羟基）；修饰发生在 C1 末端，远离蛋白结合口袋；最大程度维持天然 PHS 亲和力。

Linker 推荐：PEG4 柔性接头，缓解空间位阻，改善脂溶性探针水溶性。

缺点：多步保护 / 脱保护，合成步骤长，对选择性控制要求高。

二、应用场景

脂质 Pull-down + LC-MS

细胞示踪成像

体外亲和力定量 SPR/MST

微生物抑菌靶点研究

三、储存与操作注意事项

1.稳定性

全饱和烷基链，无双键，氧化风险低于不饱和鞘氨醇；但头部多羟基，避免强氧化剂、强碱；无需严格避光，长期保存棕色管更佳。

2.溶解性

强疏水性，纯水难溶；母液使用无水 DMSO / 乙醇配制；细胞孵育时预先与 BSA 复合，防止析出聚集。

3.Pull-down 痛点：长烷基链疏水非特异性吸附

洗涤缓冲添加 0.05%~0.1% Triton X-100，少量乙醇（≤5%）降低非特异结合。

4.合成后强制活性质控

体外对比游离 PHS 与探针：MST 验证靶蛋白亲和力；若做酶学实验，验证是否保留激酶底物活性。

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