Alexa Fluor 660 NHS 酯：可使染料水溶性与光稳定性同步提升

技术参数

中文名：AF660 琥珀酰亚胺酯 / Alexa Fluor 660 NHS 酯

英文名：Alexa Fluor 660 NHS Ester / AF660-NHS

激发 / 发射：Ex ≈ 668 nm / Em ≈ 698 nm（远红区，适配 633 nm 与 647 nm 激光）

外观：深色（紫黑至近黑）固体粉末

保存条件：-20°C，避光、干燥，避免反复冻融；建议分装

溶解性：易溶于无水 DMSO、DMF；微量可溶于 pH 8.0–9.0 碳酸氢盐/硼酸盐缓冲液

纯度：≥95%（HPLC）

生产信息：陕西新研博美

试剂的定义

AF660-NHS 是 Thermo Alexa Fluor 系列中一款远红区（far-red）荧光染料的 N-羟基琥珀酰亚胺活化酯，核心由 AF660 磺酸化花菁类母核 + NHS 离去基组成，专用于与蛋白、抗体、多肽或胺修饰寡核苷酸上的伯胺（Lys ε-NH₂、N 端 α-NH₂）发生酰胺化反应，形成稳定共价偶联物。

从结构组成拆看：AF660 母核在设计上延续了 Alexa Fluor 系列"磺酸化花菁"路线——相比经典 Cy5，它在母核上引入了更多磺酸/羧酸取代，使染料水溶性与光稳定性同步提升，且在 pH 4–10 区间内荧光强度几乎不受质子化影响（Cy5 在 pH < 6 时有轻微淬灭倾向）。NHS 酯端则是经典的"活化羧酸"策略：染料母核的羧基先与 N-羟基琥珀酰亚胺在 DCC/EDC 类缩合剂下成酯，得到橙红至深色固体，临用前用无水 DMSO 溶解加入 pH 8.3 左右的碳酸氢钠缓冲反应体系，10–30 min 内即可完成对 IgG的标记，F/P 比典型落在 3–6 之间。偶联后的 AF660-抗体在 668/698 nm 通道输出信号，人眼不可见但 CMOS/sCMOS 与大部分流式 640 nm 通道均可捕获，是 western blot 近红双色、流式多色 panel、免疫组化 Tyramide 放大体系中"红区占位"的主力染料之一。

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温馨提示：本文章所提供的信息仅用于科研知识分享，不构成任何操作建议，实验者应依据官方说明及原始研究文献自行判断。以上试剂仅供科研使用，不可用于人类，非药用，非食用。

文章来源：陕西新研博美生物科技有限公司小编小言