装柱那点事儿：手把手教你装出高效层析柱

那位拧开柱管、抓起填料瓶就要倒的同学，先别急！装层析柱可不是 “倒进去就行” 的粗活 —— 填料装得匀不匀，直接决定了后续分离效果好不好。这活儿精细又讲究，跟着我们一步步来，新手也能装出满意的高效柱～

一、先算再装：精准算好填料用量

装柱第一步，得先算准需要多少填料，避免 “装不够” 或 “装不下” 的尴尬。

核心计算公式

所需填料体积 = 计划柱高 × 柱管底面积 × 压缩因子

计划柱高：你想要的最终柱床高度（可查空柱说明书的最大允许高度）

柱管底面积：圆的面积公式 S = π × (柱管直径/2)²（直径从空柱参数里找）

压缩因子：不同填料受压后会收缩，这个系数看填料说明书就行，比如琼脂糖填料通常在 1.05-1.15 之间

比如 Tricorn 柱的高度调节范围小，算准用量尤其关键，别等倒进去才发现要么差一截，要么溢出来。

二、配好匀浆：打好装柱基础

算好体积后，就该配制装柱用的填料匀浆了，这步要耐心，细节决定成败。

1,取填料：轻柔摇晃填料瓶，让填料和保存液充分混匀，倒进量筒后静置等待沉降 —— 别着急读数，等体积稳定了再记。

2,换缓冲液：把瓶里的保存液换成装柱缓冲液（常用低浓度氯化钠溶液，防止填料挂壁），可以用抽滤或者倒掉上清液的方法置换。

3,调浓度：把填料和缓冲液混成 40%-60% 的匀浆（具体浓度看填料说明书），太稀会导致柱床松散，太稠容易产生气泡。

三、组装验漏：杜绝漏液返工

别小看拼柱子！一个接口没拧紧，装到一半漏液就得从头来过。

组装要点

用过的空柱要彻底清洗，密封圈上不能留残留填料，否则会漏液；

清洗后的部件要擦干再装，水滴会让密封圈变滑，导致内管移位；

柱管、装柱器、接头要逐个拧紧，确保无缝隙。

验漏操作

把组装好的柱子连到层析系统，开工作流速加压，检查所有接口有没有渗漏 —— 确认不漏了，才能进入下一步装柱。

四、装柱实操：流速 + 压力两步走

验漏没问题后，就可以正式装柱了，核心是 “先流速、后压力” 的两步压实法。

1,倒匀浆：倒出柱管内的液体，垂直固定柱管，用玻璃棒引流，一次性把匀浆倒进柱管（别分多次，避免分层），加满液体后拧紧上端口。

2,恒定流速阶段：把柱子连到 ÄKTA 系统，下端通大气，开恒定流速 —— 看着压力慢慢升高，填料会逐渐沉降、压实成柱床。

3,恒定压力阶段：拆去装柱器，把柱子下端接入系统，设定恒定压力 —— 此时流速会慢慢减慢，直到不再变化，说明柱床已经压实稳定了。

五、装好柱头：牢牢固定柱床

柱床不再下降后，用马克笔标记柱床位置，然后根据柱型装柱头：

XK/HiScale 柱：把柱头调节杆转到标记线下 1-2mm，拧紧上端黑色部件，让密封圈充分膨胀，固定柱床；

Tricorn 柱：先放好上端滤膜，拧紧柱头压实滤膜和柱床，再锁上柱头上方的锁扣。

六、测柱效：确认装柱合格

装完得 “验收” 一下，看看柱效达不达标，常用两种简单方法：