全单核细胞（Pan Monocyte）分选科普

一、什么是单核细胞？—— 免疫网络的 “多面手”

单核细胞是一类来源于骨髓造血干细胞的白细胞，在血液中循环，可迁移至组织中分化为巨噬细胞或树突状细胞。它们在人体内扮演着多重角色：

吞噬与清除：吞噬病原体、凋亡细胞和异物，维持内环境稳定。

抗原呈递：摄取并处理抗原，将其呈递给 T 细胞，启动适应性免疫应答。

细胞因子分泌：释放多种细胞因子，调节炎症反应和免疫细胞功能。

人外周血中的单核细胞并非均一群体，根据表面标志物 CD14 和 CD16 的表达水平，可分为三个主要亚群：

1,经典型单核细胞（Classical monocytes）：CD14++CD16–，占单核细胞总数的 80-90%，是主要的吞噬和炎症调节细胞。

2,中间型单核细胞（Intermediate monocytes）：CD14++CD16+，与炎症和组织修复相关。

3,非经典型单核细胞（Non-classical monocytes）：CD14+CD16++，约占 5-10%，参与血管稳态和免疫监视。

这三个亚群在功能和疾病关联上存在显著差异，因此，在许多研究中，需要同时分离出所有单核细胞亚群，即进行 “全单核细胞（Pan Monocyte）” 分选。

二、全单核细胞分选的意义：为什么要分离所有亚群？

在生理和病理研究中，全单核细胞分选具有重要价值：

基础研究：同时获得三个亚群，可全面研究单核细胞的发育、分化、功能异质性以及在免疫应答中的整体作用。

疾病研究：在感染、自身免疫病、心血管疾病和癌症等多种疾病中，不同单核细胞亚群的比例和功能会发生动态变化。分选出全单核细胞，有助于分析亚群失衡与疾病进展的关系，筛选潜在的生物标志物和治疗靶点。

功能实验：许多体外实验，如诱导单核细胞分化为树突状细胞、研究抗原摄取和呈递、或分析细胞因子分泌谱，都需要使用未受干扰的、高活性的全单核细胞群体。

三、全单核细胞分选的技术原理：如何精准分离目标细胞？

全单核细胞分选依赖于基于细胞表面标志物的免疫分离技术，主流方法包括磁珠活化细胞分选（MACS）和流式细胞术分选（FACS）。

1,磁珠活化细胞分选（MACS）：

这是一种常用的 “未触碰（untouched）” 分选方法。其核心原理是：不直接标记目标单核细胞，而是通过抗体鸡尾酒标记所有非单核细胞（如 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、树突状细胞等），然后利用磁珠将这些 “杂质” 细胞从样本中耗竭掉，剩余的即为高纯度的全单核细胞。这种方法的优势在于，避免了抗体与单核细胞表面分子的结合，最大程度保留了细胞的天然活性和功能，特别适合后续的功能学研究。

2,流式细胞术分选（FACS）：

通过荧光标记的 CD14 和 CD16 抗体，可以清晰地分选出三个单核细胞亚群。如果需要全单核细胞，可以将这三个亚群的门控合并后进行分选。该方法精度高，但设备要求高，操作时间较长。

无论采用哪种技术，分选试剂的特异性和分选策略的合理性，都是获得高纯度、高活性单核细胞的关键。

四、专业工具推荐：Miltenyi 全单核细胞分离试剂盒助力精准研究

在全单核细胞分选领域，Miltenyi 旗下的 **Pan Monocyte Isolation Kit, human（货号：130-096-537）** 是经过广泛验证的优质工具，由优宁维代理供应，为科研人员提供可靠支持。

产品核心信息

分选原理：采用间接磁珠标记的耗竭法。通过生物素化抗体鸡尾酒标记非单核细胞，再结合抗生物素磁珠，在磁场中去除这些细胞，从而获得未触碰的、包含所有三个亚群的高纯度单核细胞。

分选效果：

分选前（图 1）：在 PBMC 样本中，CD14 + 单核细胞（左下和右上群）混杂在大量 CD14 - 淋巴细胞（右下群）中。

分选后（图 2）：样本中几乎全为 CD14 + 单核细胞，且同时保留了 CD16–和 CD16 + 的所有亚群，纯度和完整性得到了保障。

下游应用：非常适合需要避免抗体结合影响的功能研究，如单核细胞活化与分化、细胞因子分泌、信号转导、抗原摄取与呈递，以及体外诱导分化为树突状细胞等实验。

适配设备：可与 MS、LS、XS 或 autoMACS® 分选柱兼容，满足不同规模的实验需求。

产品链接：Pan Monocyte Isolation Kit, human（货号：130-096-537）

五、常见问题 FAQ

Q1：全单核细胞分选和分选出特定单核细胞亚群有什么区别？

A：全单核细胞分选是同时富集所有 CD14 + 的单核细胞，包括经典型、中间型和非经典型三个亚群，用于研究单核细胞的整体功能。而分选出特定亚群（如仅 CD16 + 亚群）则用于研究特定亚群的独特功能。

Q2：为什么推荐使用 “未触碰（untouched）” 的分选方法？

A：“未触碰” 分选法不直接标记单核细胞，避免了抗体与细胞表面分子的交联，不会人为激活或改变细胞的功能状态，因此分选后的细胞更适合进行功能学和信号通路等敏感实验。

Q3：Miltenyi 这款试剂盒可以从哪些样本中分离单核细胞？

A：该试剂盒专为从人外周血单个核细胞（PBMCs）中分离单核细胞而设计。

Q4：分选后的单核细胞可以保存吗？

A：为了保证细胞活性和功能，建议分选后立即用于下游实验。如需保存，可根据实验需求，采用合适的冻存方案，但冻存过程可能会对部分细胞功能产生影响。

Q5：优宁维提供的这款产品有哪些支持？

A：优宁维不仅提供 Miltenyi 全单核细胞分离试剂盒，还配备专业的技术支持团队，可协助解决实验中的问题、优化分选方案，助力科研顺利推进。