单细胞悬液质量优化全攻略

随着流式细胞分析、细胞分选、单细胞组学、质谱流式等技术快速发展，单细胞水平研究已成为肿瘤免疫学、神经生物学等领域的核心方向，精准还原细胞特异性与组织异质性。而高质量单细胞悬液，是所有单细胞相关实验成功的核心前提。

当前组织（以肿瘤组织为代表）制备单细胞悬液主要依赖机械解离、酶解、化学解离三种方式，但传统方法缺乏统一标准，易出现细胞损伤、团块、碎片、死细胞过多、红细胞污染等问题，直接导致实验重复性差、数据失真。借助Miltenyi 标准化解决方案，可一站式完成单细胞悬液质量优化，为下游实验筑牢样本基础。

一、传统单细胞悬液制备的常见痛点

机械解离法的研磨力度、酶解时间、吹打强度全靠人工把控，批次差异极大，很容易造成：

1,细胞活性低、碎片化严重，丢失珍贵细胞；

2,细胞团块多，造成标记不完全、非特异性结合；

3,死细胞、细胞碎片干扰，拉高实验背景噪音；

4,脾脏、心脏、肝脏等样本红细胞残留，影响有效细胞识别；

5,实验流程无标准化，结果难以重复。

这些问题都会直接降低流式检测、细胞分选、单细胞测序的准确性，因此单细胞悬液质量优化，是样本处理中必不可少的关键步骤。

二、Miltenyi 单细胞悬液质量优化五大核心方案

针对传统制备的各类问题，Miltenyi 提供一套完整、温和、标准化的优化体系，从组织解离到终悬液纯化，全方位提升单细胞悬液质量。

1. gentleMACS 全自动温和组织解离

gentleMACS Dissociator 是组织解离的标准化核心工具，也是优化悬液质量的第一步。它搭配全自动解离器、专利解离管、组织特异性解离试剂盒与预设程序，实现温和、快速、自动化解离。

相比人工操作，gentleMACS 可稳定控制机械力度与酶解条件，避免细胞损伤，最大程度保留细胞活性、表面表位与细胞功能，适用于脾脏、肝脏、肿瘤、表皮等多种组织，真正做到解放双手、实验结果高度可重复。

2. 预分离去除细胞团块

粗悬液中的细胞团块会造成抗体标记不完全、非特异性结合，还会影响后续细胞培养状态。

通过 Miltenyi 配套细胞滤器、筛网对粗悬液进行预分离，可快速过滤团块与组织残块，获得分散均匀的单细胞悬液，减少无效干扰，提升后续标记与分选纯度。

3. 死细胞去除：降低背景干扰，保证数据准确

死细胞会释放 RNA，增加测序背景噪音，同时影响细胞计数与分选准确性，严重干扰下游实验。

Miltenyi 死细胞去除试剂盒可高效清除悬液中死细胞，大幅提升细胞活率。注意：样本细胞活率＜30% 时不建议死细胞去除操作，避免细胞群体与分群发生改变；优化后细胞活率可稳定达到 90% 以上，满足单细胞测序、细胞分选等高要求实验。

4. 去除细胞碎片：避免堵塞与非特异性标记

机械研磨、酶解吹打、离心操作都会产生细胞碎片，碎片不仅易堵塞微流体芯片，还会造成流式非特异性染色。

使用 Miltenyi 细胞碎片去除试剂盒，可快速、高效清除碎片，无需复杂操作，就能获得干净、均一的单细胞悬液，保障下游实验顺畅。

5. 红细胞裂解：清除红系干扰，精准识别有效细胞

脾脏、心脏、肝脏、肿瘤等样本制备悬液时，常伴随大量红细胞，会导致有效细胞识别不准、有核率偏低、细胞界限模糊。

Miltenyi 红细胞裂解液可温和、高效裂解人、小鼠、大鼠样本中的红细胞，对有核细胞无损伤，裂解后简单洗涤即可获得纯净的单细胞悬液。

三、高质量单细胞悬液的标准

经过 Miltenyi 全套优化方案处理后，合格的单细胞悬液需满足：

1,细胞活率达标（常规实验≥70%，单细胞测序≥85%）；

2,无细胞团块、无明显细胞碎片；

3,无红细胞残留或残留量极低；

4,细胞分散均匀、表面表位完整；

5,批次间重复性好。

优宁维作为 Miltenyi 官方授权供应商，提供 gentleMACS 组织解离系统、死细胞去除试剂盒、红细胞裂解液、细胞滤器等全系列产品，搭配专业技术支持，为科研工作者提供一站式单细胞悬液质量优化解决方案。

单细胞悬液质量优化常见问题（FAQ）

1. 单细胞悬液质量优化，必须用到这 5 步吗？

不需要，可根据样本状态选择：组织样本优先用 gentleMACS 解离；有团块先预分离；死细胞多则去死细胞；有碎片用碎片去除试剂盒；含红细胞则裂解红细胞。

2. gentleMACS 可以处理哪些组织？

可处理脾脏、肝脏、肿瘤、皮肤、心脏、脑组织、骨骼肌等多种人、小鼠、大鼠组织，均有对应优化程序。

3. 死细胞去除操作有什么禁忌？

样本细胞活率＜30% 不建议进行死细胞去除，会导致细胞数量骤减、细胞分群改变，影响实验真实性。

4. 红细胞裂解会损伤免疫细胞吗？

Miltenyi 红细胞裂解液为温和配方，特异性裂解红细胞，对 T 细胞、B 细胞、单核细胞等有核细胞无明显损伤。

5. 细胞碎片只能通过试剂盒去除吗？

人工控制吹打、离心力度可减少碎片，但难度大；使用碎片去除试剂盒是更稳定、高效的方式，适合科研标准化实验。

6. 优化后的单细胞悬液能放多久？

建议制备后 30 分钟内开展下游实验，短期可置于冰上保存，避免细胞活性下降。

7. 在哪里可以购买 Miltenyi 悬液优化相关产品？

优宁维官网提供 Miltenyi 全系列单细胞悬液制备与优化产品，正品保障、现货供应，同时提供样本处理方案指导。

总结

单细胞悬液质量直接决定实验成败，Miltenyi 以 gentleMACS 标准化解离为核心，搭配死细胞去除、碎片去除、红细胞裂解、预分离五大优化方案，从源头解决传统样本制备的痛点，获得高活率、高纯度、高均一性的单细胞悬液。优宁维持续为广大科研用户提供正品产品与专业技术服务，助力单细胞研究高效推进。