2YR企业会员
发布人:新维创生物科技(重庆)有限公司
发布日期:2026/2/9 14:30:09
CY5.5-迷迭香酸的构建依赖于荧光染料与生物分子的特异性共价结合。其核心机制可分为以下步骤:
1. 活性基团选择:
1. CY5.5端:通常采用NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)或马来酰亚胺作为活性基团。NHS酯可与生物分子中的氨基(-NH₂)反应形成稳定的酰胺键,而马来酰亚胺则优先与巯基(-SH)结合。
2. 迷迭香酸端:其分子结构中的酚羟基(-OH)和羧基(-COOH)均可作为反应位点。例如,羧基可通过与CY5.5的氨基或羟基发生酯化反应形成酯键,而酚羟基则可能参与醚键或硫醚键的形成。
2. 反应条件优化:
1. pH控制:酰胺键形成需在弱碱性条件(pH 7.5-8.5)下进行,以促进NHS酯的水解和氨基的脱质子化;酯化反应则需在酸性或中性环境中避免羧基的过度离解。
2. 温度与时间:反应通常在室温至37℃下进行,时间从数小时至过夜不等,需通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监测反应进度。
3. 催化剂与溶剂:有机溶剂(如DMSO、DMF)可提高反应物的溶解性,而偶联剂(如EDC/NHS)可加速羧基与氨基的缩合反应。
3. 产物纯化与表征:
1. 通过大孔吸附树脂(如NK109)或高效液相色谱(HPLC)纯化目标产物,去除未反应的染料或副产物。
2. 利用质谱(MS)确认分子量(如C₅₆H₆₇N₄O₈,分子量923),并通过核磁共振(NMR)分析化学键类型(如酰胺键、酯键)。
相关新闻资讯