AtaGenix蛋白定制服务助力研究CCA细胞对Pemigatinib的耐药机制

研究背景

胆管癌(Cholangiocarcinoma，CCA)作为起源于胆管上皮的高度恶性肿瘤，具有起病隐匿、预后极差的特点。2020年FDA批准培米替尼(Pemigatinib)成为CCA靶向药物，但临床耐药现象频发，严重影响疗效，患者五年生存率仍不足5%。近年来，Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2（ROCK2）被发现与多种肿瘤的化疗耐药相关。

江西肿瘤医院研究团队在《Cell Death & Disease》上发表的研究（DOI: 10.1038/s41419-025-07804-9）揭示了ROCK2在CCA细胞中对Pemigatinib耐药的作用机制，并探讨其是否通过调控铁死亡（ferroptosis）及相关蛋白DRP1和UBA52来发挥作用。

客户需求

江西肿瘤医院研究团队需要高纯度的GST、GST-UBA52、His-ROCK2和His-Drp1蛋白。用于进行GST pull-down实验，验证ROCK2、UBA52与DRP1之间的相互作用。普健生物（AtaGenix Laboratories Co., Ltd.）受托提供GST、GST-UBA52、His-ROCK2和His-Drp1的定制蛋白表达与纯化服务，确保蛋白质适用于相互作用验证和后续的功能实验。

技术挑战

1. 蛋白表达与纯化难度高：UBA52属于泛素相关蛋白，而ROCK2与DRP1均为多结构域的功能性调控分子，其全长或关键功能域在原核或真核系统中均存在表达难度，易出现错误折叠、形成包涵体或被部分降解。

2. 互作验证的敏感性：ROCK2与DRP1之间不存在直接相互作用，而是通过UBA52介导的竞争性结合来调控DRP1的泛素化水平，这对蛋白复合物的体外重建提出了极高要求。

3. 翻译后修饰的模拟：UBA52作为E3泛素连接酶，其功能依赖于正确的空间构象和酶活性，体外实验需确保其能够介导DRP1的泛素化。

定制蛋白解决方案

根据客户的需求及提供的序列，AtaGenix为客户提供了高纯度、低内毒素、正确折叠和生物活性的GST、GST-UBA52、His-ROCK2和His-Drp1蛋白，用于体外实验验证ROCK2与Drp1，UBA52的相互作用。这些蛋白在Co-IP和Western blot分析中起到关键作用，阐明ROCK2通过竞争性结合UBA52稳定Drp1的机制，支持了ROCK2/UBA52/Drp1轴在耐药中的核心作用。

关于我们

普健生物致力于提供高质量的蛋白抗体开发、功能验证等一站式定制服务，助力科学研究高效推进。