长沙上禾生物科技有限公司

上禾生物--专业的标准化植物提取物生产企业

公司现有主要产品为：杜仲提取物-绿原酸（5%-98%）、藤茶二氢杨梅素（20%-98%）、科罗索酸（1%-98%）、苦杏仁苷（50%-98%）、厚朴提取物厚朴酚，和厚朴酚（10%-98%）等标准化高纯植物提取物。针对您的个性需求，依托我们强大的研发能力，为您提供产品定制及外包服务。以满足您在开发和生产天然产品领域持续创新的需求

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金银花FlosLonicerae又名忍冬、双花，为临床常用中药,具有清热解毒、凉散风热之成效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热伤风、温病发热等。在中成药中，金银花或以细粉直接入药，或以提取物的方式入药，但大部分制剂以后者的方式入药。

意图树立金银花提取物中绿原酸含量的HPLC测定办法。办法国产C18柱(4.6mm×250mm,7μm);活动相为乙腈：0.4%磷酸(12∶88);检测波长为327nm;流速1ml·min-1;进样量10μl;柱温25℃。成果绿原酸在0.0716～0.6444μg范围内线性关系杰出，r=0.9996;均匀回收率99.99%，RSD=1.61%(n=6)。定论该办法简洁、快速、******，可用于金银花提取物的含量测定及质量操控。

金银花入药有两种方式，一是以全草直接投料,煎煮入药，即以煎煮液(即药材的提取液)作为半成品(中间体);另一种是先提取有用部位，而后以提取物投料，即以提取物作为中间体(原料)为了有用操控金银花提取物(中间体)的内涵质量，本试验参考了有关文献[2，3]及2005版《我国药典》[4]办法，选用高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸含量。

1仪器与试药

Agilent1100series高效液相色谱仪(G1322A排气阀，G1311A泵，G1316A柱温箱，G1314A紫外检测器)，chemistation色谱工作站，KromasilC18色谱柱，超声提取器，绿原酸对照品(我国药品生物制品判定所，批号110753-200212)，金银花提取物(本试验室克己)，乙腈，磷酸均为剖析纯;水为双蒸水。

2办法与成果[5]

2.1剖析办法的树立——别离及检测条件的选择

2.1.1色谱条件色谱柱为国产KromasilC18柱(250mm×4.6mm，7μm);柱温25℃;活动相为乙腈-0.4%磷酸(12∶88);流速为1ml·min-1;检测波长327nm。

2.1.2pH值对峰形的影响绿原酸归于有机酸类物质，在HPLC测定时易发作前沿或拖尾峰，活动相参加酸能够改进这种现象。本试验比较了水、乙酸、磷酸对峰形的影响，当选用0.4%磷酸时，可得到较好的色谱峰形。

2.1.3色谱体系适应性试验在选定条件下，绿原酸和样品中其他组分可基线别离，绿原酸与其相邻色谱峰的别离度大于1.5，理论塔板数(N)为5000以上。

a-对照品b-供试品

2.2对照品溶液的制备精细称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每毫升含35.8μg的溶液，即得。2.3供试品溶液的制备精细称取本提取物10mg，置100ml容量瓶中，双蒸水溶解，超声2min后，再用双蒸水定容至刻度，摇匀，过0.45μg微孔滤膜，取续滤液即得。

2.4线性范围的考察及其规范曲线的制作精细汲取对照品溶液2，4，6，10，14，18μl，别离注入液相色谱仪。按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积积分值(A)对进样量进行回归，得回归曲线方程：Y=2468.4X-16.205，r=0.9996。成果标明，绿原酸在0.0716～0.6444μg范围内与峰面积呈杰出的线性关系。

2.5精细度试验精细汲取对照品溶液10μl，按上述色谱条件重复进样6次，记载各组绿原酸峰面积值，成果均匀峰面积为：840.5，RSD为0.69%(n=6)。

2.6安稳性试验取同一供试品溶液，别离于0，2，4，6，8h进样10μl，测得绿原酸的均匀峰面积值为：680.24，RSD为：0.38%(n=5)，标明供试品溶液在8h内安稳。

2.7重复性试验取同一批号(070204)样品6份，按含量测定办法测定，成果绿原酸均匀含量为28.01%，RSD为1.07%(n=6)。

2.8加样回收率试验精细称取已知含量的金银花提取物6份，别离精细增加绿原酸对照品适量，按供试品溶液的办法制备，测定，核算回收率。

2.9样品测定取3批样品，依照上述办法制备供试品溶液，进样10μl，依照已断定的色谱条件测定，按峰面积值用外标法核算样品中绿原酸的含量。

3评论
 

金银花提取物以有机酸为有用成分，本试验以绿原酸含量作为金银花提取物的质量操控目标，一起测定了3批金银花提取物中绿原酸的含量，经过核算，其含量均在20%以上。本文所树立的办法简洁、方便，重复性及安稳性均较好，可在实际出产中用于该提取物的质量操控。本文所做的工作为开发金银花的相关产品供给了质量监控办法。

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