什么是预吸附二抗？和普通二抗有什么区别？

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2025/1/14 9:28:52

预吸附二抗是一种经过特殊处理的二抗，其主要目的是为了降低二抗与细胞和组织样品中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应的风险，从而提高实验的特异性和准确性。预吸附处理，也称为交叉吸附，是一种额外的纯化步骤，通过利用具有潜在交叉反应性的物种制备血清蛋白，使二抗混合物通过固定有这种血清蛋白的层析柱。在这个过程中，非特异性的二抗会被柱子吸附从而留在柱中，高特异性的二抗会从柱子中流穿从而被收集下来。

与普通二抗相比，预吸附二抗的主要区别在于其特异性和交叉反应性。普通二抗没有经过预吸附处理，因此可能会与样本中的内源性免疫球蛋白或者多标反应中其他的一抗发生交叉反应，导致非特异性的背景信号增强。而预吸附二抗由于经过了额外的处理步骤，其特异性更高，非特异性结合更少，因此在进行多色实验或者样本中含有内源性免疫球蛋白时，预吸附二抗是更理想的选择。

预吸附二抗的应用主要有两种情况：一是当样本含有内源性免疫球蛋白时，二是在进行多色实验时，预吸附二抗可以最大程度地降低种属交叉反应性。此外，预吸附二抗还特别适合于单色、双色或三色免疫组织化学（IHC）标记实验，因为它们可以减少背景染色，提高信号的清晰度。

1、在做免疫组化或者免疫荧光时，如果一抗的宿主来源和样本的种属同源，比如样本是大鼠组织，而一抗来源是小鼠，因为大鼠和小鼠属于同源，大鼠组织中内源的IgG和一抗具有相似的序列，所以容易形成交叉污染。在选择二抗时，最好是可以选择排除大鼠干扰的预吸附二抗。

2、在免疫组化或者免疫荧光双染时，为了防止两个一抗还有样本之间互相干扰，此时建议选择预吸附二抗来降低非特异性干扰。