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发布人：上海雅吉生物科技有限公司
发布日期:2025/1/13 8:49:35
一、产品信息
二、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激90s，再冰浴2min；
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀，并全涂至对应抗性LB平板上；
⑤将平板正向培养1h，再倒置培养14-16h。如果是30度培养则培养20h；
（如果第二天菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果第二天无菌落，请加入10μl质粒转化）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入抗生素，37℃震荡培养14~16h，根据实验需要提取质粒。
2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏。
3、穿刺菌：穿刺接种后四区划线，挑单菌落培养。
4、平板：直接挑单菌落液体培养。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
三、转化图片
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