上海晶风生物科技有限公司

有机磷类和氨基甲酸酯类

农药残留速测试剂盒

使用说明书

（酶抑制法）

1 适用范围

适用于检测新鲜蔬菜中的有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量。

2 检测依据

试剂盒使用方法依据国家标准GB/T 5009.199-2003 《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。

3 试剂盒组成

4 溶液配制

4.1缓冲溶液：取500 mL纯净水，加入5 mL缓冲试剂浓缩液，混匀备用，室温保存；

4.2胆碱酯酶：无需配制，使用时直接取100 μL，4℃冷藏保存；

4.3显色剂：无需配制，使用时直接取100 μL，4℃冷藏保存；

4.4底物：加入10 mL纯净水溶解，使用时直接取100 μL，4℃冷藏保存。

5 样品提取

选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土等杂物后取样。叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样品，果菜从不同个体的表皮处取样。

叶菜取2克1 cm见方叶尖部分于样品杯中，茎类及水果取3克1 cm见方表皮于样品杯中；加入10 mL缓冲液，震荡1-2 min；倒出提取液或过滤液，静置2 min待测。

葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、番茄汁液等样品中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提；一些含叶绿素较高的蔬菜时，也可采取整株（体）浸提的方法，减少色素干扰。

6 操作步骤

6.1对照测试

在一支干净试管中分别加入2.5 mL缓冲溶液，100 μL显色剂，100 μL胆碱酯酶，混匀；37℃恒温设备中放置10分钟后加入100 μL底物，摇匀并立即倒入比色皿，用农残检测仪进行对照测试。

6.2样品测试

在另一支干净试管中分别加入2.5 mL样品提取液，100 μL显色剂，100 μL胆碱酯酶，混匀；37℃恒温设备中放置10分钟后加入100 μL底物，摇匀并立即倒入比色皿，用农残检测仪进行样品测试。仪器根据测定结果显示出抑制率。

操作提示：在加底物的环节中，可预先将底物加入比色皿中，待恒温静置10分钟时间一到，马上将反应管中的反应液倒入已经加有底物的比色皿中，并迅速放入测试通道进行测试，这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。

7 结果判定

以分光光度计测试时，于412 nm处测定吸光度值在3分钟内的变化，按以下计算公式算出抑制率：

抑制率（%）=[(△A0-△At)/ △A0]×100%

以农残检测仪检测时，其抑制率＞50%时检测结果为阳性，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。对于阳性结果的样品需要重复检验2次以上，如有必要，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。

8注意事项

8.1酶活性要求：本试剂盒中酶正常活性△A₀≥0.3，符合国标方法要求；

8.2使用：任何试剂应遵循使用一瓶配制一瓶原则，用前应摇匀，用完后才是用新试剂，防止变质；

8.3试剂只出不入原则：从任何试剂瓶吸出的试剂，禁止再次吸入瓶内，以免交叉污染；

8.4对色素干扰严重的过滤液，可用活性碳脱色处理，过滤或离心后，取清液作为样品提取液。

9 贮存条件与有效期

9.1保存：试剂盒应保存于4℃冰箱，保质期12个月，常温保存3个月；