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木瓜蛋白酶是一种半胱氨酸水解酶，具有广泛且特异的切割活性，甚至可以在高温的条件下保持酶活性。木瓜蛋白酶可以用于细胞培养中的组织解离成单细胞，用它来进行的细胞分离时会比其他蛋白酶更温和，因此更适用于皮质神经元、视网膜和平滑肌的组织分离，尤其适合对神经组织进行分解。由于不同品牌的酶制剂略有差异，所以小优以Absin和Worthington的产品为例给大家介绍。

关于Absin
爱必信（上海）生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及耗材的高新技术企业。公司秉承“为生命科学创造便利！为客户创造价值！为员工创造幸福人生！”的发展理念，拥有专业的产品研发质检团队、市场营销团队及先进仓储物流等管理团队。主要经营产品有：生化试剂（常用生化试剂、生物学实验常用试剂、荧光染料、激动剂/抑制剂，植物提取物）、细胞生物学（细胞培养产品、血清、基质胶、添加剂、检测试剂盒）、免疫学产品、分子生物学产品、实验室仪器/耗材、产品定制和检测服务。

关于Worthington
Worthington Biochemical Corporation，1947年成立于新泽西州弗里霍尔德，是专业的酶和生物化学品制造商，其生产的高质量纯化酶、蛋白质、核酸及细胞分离试剂盒广泛用于生命科学研究、原代和干细胞分离、生物加工、生物制药、诊断和生物技术应用。凭借超75年的专业积淀，Worthington拥有全面的生命科学酶资源库，包括参考手册和广泛引用的全球知名同行评审期刊。

一、基础知识
1.功能：木瓜蛋白酶可消化大部分蛋白底物，比胰蛋白酶范围更广。木瓜蛋白酶具有广泛的特异性，可断裂基础氨基酸，亮氨酸或甘氨酸的肽键。它还能水解脂类和酰胺类化合物。最佳pH范围为6.0-7.0。木瓜蛋白酶制剂应在使用前在活化溶液中孵育，以确保充分发挥活性。
2.抑制剂：PMSF、α2-巨球蛋白、Hg2+及其他重金属等
3.激活剂：EDTA、半胱氨酸、硫化物和亚硫酸盐

二、木瓜蛋白酶-Absin
1.外观：浅黄色或白色固体粉末
2.保存：2-8℃干燥保存，有效期1年
3.溶解：取适量本品溶于水配制成10mg/ml的储存液。使用前需经活化以得到完全酶活性，通常用含~5mM L-半胱氨酸的缓冲液来稀释，比如，常用酶活化缓冲液含1.1mM EDTA，0.067mM巯基乙醇和5.5mM半胱氨酸盐酸盐，经30min孵育后，酶得以完全活化。建议使用前经0.22um滤膜过滤除菌。

三、木瓜蛋白酶- Worthington
1.保存：2-8℃干燥保存，有效期6个月，注意：不要冷冻保存溶解或稀释后的溶液
2.溶解：可使用EBSS溶解，酶使用前应在含有1.1mM EDTA、0.067mM巯基乙醇和5.5mM 半胱氨酸-HCl的溶液中孵育30分钟。建议在溶解后和使用前经0.22um滤膜过滤除菌。

除此之外，Worthington还有一套木瓜蛋白酶解离系统（Papain Dissociation System）：
Worthington木瓜蛋白酶解离系统是一组用于Huettner和Baughman的神经细胞分离方法的试剂（J. Neurosci.，6，3044，1986）。每批均经过大鼠脊髓神经细胞分离性能测试，该试剂盒为每次解离提供新鲜制备的酶溶液。
1.组分：包装内含有足够的材料，可分离5个独立的组织等分试样，每个试样的体积可达 0.3-0.4cm3。对于较大的组织样本，应在每个步骤中按比例准备较大体积的试剂，并按照方案中所述的相同比例混合。
小瓶1：无菌Earle平衡盐溶液 (EBSS)，含钙、镁、碳酸氢盐和酚红，每包一瓶，100ml，用于配制剩下组分和稀释酶制剂。
小瓶2：含有L-半胱氨酸和 EDTA 的木瓜蛋白酶，每包含有5x100units一次性小瓶。使用时用5ml EBSS配制得到20units/ml的木瓜蛋白酶溶液，注意，木瓜蛋白酶溶液需要在 37°C下短暂孵育以确保完全溶解度和活性。
小瓶3：脱氧核糖核酸酶I (DNase)，每包5x2000units一次性试剂瓶。使用时用0.5ml EBSS配制得到2000units/ml的脱氧核糖核酸酶溶液。避免剧烈混合。
小瓶4：含牛血清白蛋白的卵粘蛋白酶抑制剂，每包一瓶。使用时用32ml EBSS配制得到10mg/ml的溶液，分装保存。 
2.保存：2-8°C下储存4-6个月。  

四、关于单位换算（mg/ml与U/ml）的内容大家可以参考《胶原酶使用秘籍：保存、溶解、稀释及浓度换算》这篇内容。

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