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糖基化修饰

糖基化修饰是真核细胞内常见的翻译后修饰，指一个或多个糖基通过共价键连接到蛋白质分子上。这种修饰对蛋白质的折叠、稳定性、活性以及细胞间信号传递有重要影响。

蛋白质的糖基化修饰主要分位两类：N-连接糖基化和O-连接糖基化。N-连接糖基化的糖链连接在NXT/S(其中X是除脯氨酸外的任意氨基酸)的N(天冬酰胺)上，连接在N上的寡糖链又分为高甘露糖型，杂合型和复合型三种。

图1. N-连接糖基化三种类型

然而，糖基化也可能带来一些问题：

（1）糖基化会降低蛋白质的均一性，影响蛋白质的结晶；

（2）重组表达的糖蛋白和抗体糖型与人体内糖型的差异可能引发免疫排斥反应；

（3）异常糖基化可能导致自身免疫疾病的发生；

（4）登革热病毒抗体的非岩藻糖化可能引起ADE效应（抗体依赖性增强效应）。

去糖基化的糖苷酶为科研工作者研究糖蛋白以及异常糖基化引发的相关疾病研究提供有效工具。但是不同的糖苷酶对底物有不同的偏好性，切对不同糖苷酶对糖链的切割效率也不同。那么各种糖苷酶都有什么特点呢，下面我们来详细介绍一下。

PNGase F

PNGase F (YXX04901)是一种广谱的N-连接糖链切割酶，不具有氨基酸序列特异性，可以高效切割高甘露糖型，杂合型和复合型三种糖链。连接在天冬酰胺上的第一个GlcNAc被岩藻糖通过α(1-6)糖苷键连接修饰时也可以高效切割，但是在植物和部分昆虫细胞内，岩藻糖修饰通过α(1-3)糖苷键连接时，则不能切割。由于PNGase F不识别特定的氨基酸序列，所以PNGase F能够切割变性的蛋白，且切割变性蛋白糖链的效率一般比切割活性蛋白糖链的效率还要高。

图2. PNGase F的糖链切割位点

Endo S

Endo S (YXX05201)是一种识别Human IgG Asn 297位点复合型糖链的糖苷内切酶，切割位置为两个GlcNAc之间。

图3. Endo S的糖链切割位点

CU43

与Endo S类似，CU43 (YXX25001, EXX25001)也只能识别并切割Human IgG Asn 297位点的糖基，能高效切割杂合型和复合型两种糖链，但是切割高甘露糖型糖链的效率较低。

图4. CU43的糖链切割位点

Endo S2

Endo S2 (YXX06601)能切割Human IgG Asn297上的所有三种糖链，残留一个GlcNAc (和一个岩藻糖，如果有岩藻糖修饰)在Asn297上。

图5. Endo S2的糖链切割位点

注意

Endo S，CU43和Endo S2去糖基化高度依赖Human IgG的空间结构，如果IgG变性，则无法切割。Endo S，CU43和Endo S2无法切除Human IgA, IgM，IgE和其他物种IgG的糖链。

下面以表格的形式总结四种糖苷酶的特点：

AntibodySystem

AntibodySystem Laboratories SAS于2019年创立于法国斯特拉斯堡,专注于生命科学研究领域蛋白及抗体试剂研发生产。致力于为全球生命科学基础研究者提供高质量的蛋白，抗体产品，产品类别囊括传统多抗，经典内参抗体，标签抗体，高活性蛋白，invivo功能性抗体，低背景流式抗体，高特异性纳米抗体，特色小分子抗体，高质量磷酸化抗体，DNA/RNA抗体,PEG抗体等十余个系列;目前AntibodySystem旗下产品线涵盖500余种病毒与超级细菌，寄生虫，肿瘤，老年痴呆，帕金森，变态与过敏反应，免疫抑制与免疫激活等多个领域。

佰乐博生物

武汉佰乐博生物（Biolab Reagents）由五位毕业于华中科技大学，华中农业大学，武汉大学等知名高校，且具有二十年工作经验的生命科学领域研究者创立于2021年，凭借丰富的产品开发经验，利用全球技术平台，引进和整合全球高品质的蛋白、抗体和试剂盒产品。目前，佰乐博生物作为法国AntibodySystem和ProteoGenix在亚洲总代理，提供近30,000种生命科学试剂，核心产品涵盖蛋白、抗体和试剂盒，旨在为科研工作者提供专业、全面、可靠的试剂支持，推动生命科学研究的深入发展。