AF647-NHS/NH2/Mal/COOH/DBCO 高通量蛋白筛选、分子互作可视化全套荧光试剂

试剂基本参数

中文名称：AF647-活性脂/马来酰亚胺/羧基/二苯并环辛炔/琥珀酰亚胺酯/氨基

英文名称：AF647-NHS/NH2/Mal/COOH/DBCO

纯度：≥95%

试剂厂家：西安凯新生物

规格：1mg，5mg，10mg

储存条件：-20℃避光干燥保存，避免反复冻融

试剂描述

AF647系列是一类基于远红色荧光母体AF647、连接不同反应基团的标记试剂。该系列包括NHS酯、胺基（NH₂）、马来酰亚胺（Mal）、羧酸（COOH）及二苯并环辛炔（DBCO）五种衍生物。它们具备相同的光学核心（Ex/Em ≈ 655 nm / 680 nm），仅通过末端的活性基团实现不同的偶联方式。以下分述其核心特点与应用场景。

各衍生物核心特点

AF647-NHS

含有N-羟基琥珀酰亚胺酯，特异性靶向分子中的伯胺（-NH₂），在中性至弱碱性条件下形成稳定的酰胺键。反应效率高，是标记蛋白质、多肽的常用选择。

AF647-NH₂

即胺基衍生物，其伯胺基团可作为化学“把手”，用于与活化的羧基（如经EDC处理）或琥珀酰亚胺酯发生偶联。该形式本身不直接标记蛋白，多用于构建更复杂的荧光探针。

AF647-Mal

携带马来酰亚胺基团，专一性识别巯基（-SH）。通常在pH 6.5–7.5条件下与含半胱氨酸残基的蛋白或小分子硫醇化合物反应，生成稳定的硫醚键。

AF647-COOH

羧酸衍生物，本身不直接与常见生物分子快速反应。需经碳二亚胺类试剂（如EDC）活化后，再与伯胺偶联。适合作为中间体，用于可控连接或表面修饰。

AF647-DBCO

含有二苯并环辛炔基团，能够与叠氮化物发生无铜催化的点击化学反应（菌株促进的环加成）。此过程无需金属催化剂，生物相容性良好，适合活细胞或蛋白质表面的原位标记。

应用领域

蛋白质位点选择性标记：针对不同氨基酸残基选用对应试剂——NHS修饰赖氨酸、Mal修饰半胱氨酸；DBCO可与非天然氨基酸引入的叠氮基团实现精确标记。

荧光探针构建：NH₂或COOH衍生物作为连接中间体，可将AF647连接到纳米颗粒、聚合物或小分子配体上。

多色成像与分析：由于AF647光谱位于远红光区，与常见蓝、绿、黄光染料光谱重叠小，适合用于多参数检测体系。

活细胞标记：DBCO衍生物因反应条件温和、无需金属催化剂，可用于活细胞表面聚糖或特定蛋白的实时追踪。

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