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发布人：上海博湖生物科技有限公司
发布日期:2026/5/22 11:53:16
猪组织匀浆样本需经匀浆制备、离心取上清、适当稀释及避免反复冻融处理后，方可用于猪ELISA试剂盒检测。以下是具体操作步骤和关键注意事项：
一、组织样本处理流程
样本采集与预处理
取新鲜猪组织块（0.1–0.5g），在冰冷的PBS（0.01M, pH=7.4）中漂洗，去除残留血液。
滤纸吸干水分后准确称重，置于预冷的匀浆管中。
组织匀浆制备
按照重量(g):体积(ml) = 1:9的比例加入PBS（可含蛋白酶抑制剂）。
使用手工或机械匀浆器充分研磨：
手工匀浆：冰浴条件下上下研磨6–8分钟；
机器匀浆：10,000–15,000转/分，每次10秒，间隔30秒，重复3–5次。
可选超声破碎或反复冻融以增强细胞裂解效果。
离心取上清
将匀浆液于3000–5000×g，4℃离心10–15分钟，取上清用于检测。
若上清浑浊或有沉淀，可再次离心或过滤处理。
样本稀释与保存
根据试剂盒要求使用样本稀释液进行适当稀释（如1:2至1:5）。
不立即检测的样本应分装后于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。
二、关键注意事项
防止降解与污染：操作全程保持低温，使用无菌EP管，避免人源酶类污染。
避免溶血干扰：清洗组织时务必去除残留红细胞，防止血红蛋白影响检测结果。
试剂平衡：冻存样本检测前需在室温平衡20–30分钟，并轻轻混匀。
避免NaN3干扰：含叠氮化钠（NaN₃）的样本不可检测，因其会抑制HRP酶活性。
建议：每批样本设置阴性/阳性对照，确保ELISA检测系统的有效性与结果可靠性。
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