小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书

小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒说明书           

【兽药名称】

通用名  小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒

商品名  无

英文名  Blocking ELISA Kit for Detection the Antibodies Against Peste Des

Petits Ruminants Virus

汉语拼音  Xiaofanchushouyibingdu Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分与含量】

【作用与用途】  用于检测羊血清中小反刍兽疫病毒抗体。

【用法与判定】 

1  用法

1.1  待检样品准备  采集羊血液，待血液凝固后，以4000r/min离心10分钟，收集上清。或待血液凝固后自然析出血清。血清应澄清，无溶血。 

1.2  洗涤液配制  20倍浓缩洗涤液用纯化水作20倍稀释，混匀，置2～8℃下可存放7日。 

1.3  待检样品、阴性对照和阳性对照的稀释  在血清稀释板上用样品稀释液作2倍稀释（例如：100μl样品稀释液中加100μl待检样品或阴性对照和阳性对照），阴性对照、阳性对照各设2孔，振动混匀，勿溢出。 

1.4  操作步骤

1.4.1  取相应数量的抗原包被板，每孔加入洗涤液300μl，洗涤1次，在吸水材料上拍干。 

1.4.2  将稀释好的待检样品、阴性对照和阳性对照，各取100μl加入抗原包被板孔中，置37℃下作用1小时。

1.4.3  弃去板孔中的溶液，每孔加入洗涤液300μl，重复洗涤5次，最后一次在吸水材料上拍干。 

1.4.4  每孔加酶标记物100μl，置37℃下作用30分钟。 

1.4.5  重复洗涤5次，方法同1.4.3。

1.4.6  每孔加底物显色液100µl，置20～25℃避光作用10分钟。

1.4.7  待显色完成后每个反应孔加入终止液50μl，10分钟内在酶标仪上测定各孔OD_450nm值。

2  判定  

2.1  试验成立的条件  阳性对照OD_450nm平均值应≤0.30，阴性对照OD_450nm平均值应≥0.60，且<1.60。

2.2  判定  S为待检样品OD_450nm值，N为阴性对照OD_450nm平均值，计算待检样品阻断率（PB）=（1-S/N）×100%。如果待检样品阻断率≥50.0%，则判为小反刍兽疫病毒抗体阳性；如果阻断率<50.0%，则判为小反刍兽疫病毒抗体阴性。

【注意事项】 （1） 使用前将试剂盒应放置20～25℃平衡30分钟。

（2） 请在试剂盒规定的有效期内使用。

（3） 严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。

（4） 浓缩洗涤液用纯化水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（5） 先使用血清稀释板稀释完所有的待检样品，再将稀释好的待检样品转移到抗原包被板上，使反应时间一致。

（6） 避免底物显色液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（7） 没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，与其他组分一起置2～8℃存放。

【规格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为12个月。 

仅供科研使用