禽白血病病毒ELISA抗原检测试剂盒使用说明书

禽白血病病毒ELISA抗原检测试剂盒使用说明书

【兽用名称】

通 用 名  禽白血病病毒ELISA抗原检测试剂盒

商 品 名  无

英 文 名  Avian Leukosis Virus ELISA AntigenTest Kit

汉语拼音  Qinbaixuebing Kangyuan ELISA Jiance Shijihe

【主要组分与含量】

【作用与用途】  用于鸡的胎粪、卵清、组织样品及细胞培养物中禽白血病病毒p27抗原的检测。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒取出置25℃±3回温，至少30分钟，实验完成后置2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的单抗包被板应贮存在密封塑料袋内，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（7）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。

【用法与判定】

1  用法

1.1 样品准备  

卵清  收集稀卵清，无需稀释直接作为样品进行检测。如果卵清较粘稠，可反复冻融2次降低其粘稠度。

对照  无需稀释直接使用。

胎粪  将胎粪放入含有0.5ml 1*洗涤液的离心管中，反复冻融2次。检测前，将样品恢复至室温，5000r/min离心2分钟。吸取100μl上清，进行检测。

组织样品  取0.5g组织病料于研磨器剧中，加入0.5ml1*洗涤液研磨匀浆，将组织悬液转移至离心管中反复冻融2次，5000r/min离心2分钟，吸取100μl上清，进行检测。

细胞培养物  将细胞培养物反复冻融2次。检测前，将样品恢复至室温，5000r/min离心2分钟（若为细胞培养板，则需静置30分钟）。吸取100μl上清，进行检测。

1.2  洗涤液配制20倍浓缩洗涤液使用前，将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作20倍稀释（例如：10ml的浓缩洗涤液加190ml纯水），混匀，置2～8℃可保存7日。

1.3  操作步骤

1.3.1  将待检样品、阴性对照和阳性对照各取100μl加入到包被板中，待检样品设1孔，阴、阳性对照各设2孔，置室温（20～25℃）反应60分钟。

1.3.2  甩掉板孔中的液体，每孔加入稀释好的洗涤液300μl，无需静置，甩掉板孔中的洗涤液，共计洗涤5次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.3.3  每孔入加酶标记物100μl，置室温（20～25℃）反应60分钟。

1.3.4  洗涤5次，方法同1.3.2。

1.3.5  每孔加入底物显色液100µl，轻微振动反应板混匀，室温（20~25℃）避光显色15分钟。

1.3.6  每孔加入终止液50µl，10分钟内在酶标仪上测定各孔OD_630nm值。

2  判定  

2.1  试验成立条件  阳性对照OD_630nm平均值应≥0.5，阴性对照OD_630nm平均值应＜0.2。

2.2  判定标准  S为样品OD_630nm值，P为阳性对照OD_630nm平均值，计算S/P值。

如果S/P＞0.2，判为阳性；如果S/P≤0.2，则判为阴性

【规格】  96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒 

【贮藏与有效期】  2～8℃保存，有效期为12个月

仅供科研使用