口蹄疫病毒A型抗体固相竞争ELISA检测试剂盒说明书

口蹄疫病毒A型抗体固相竞争ELISA检测试剂盒说明书

产品名称

中文名称：口蹄疫病毒A型抗体固相竞争ELISA检测试剂盒

英文名称：Foot and mouth disease virus type A antibody solid-phase competitive ELISA detection kit

作用与用途

用于检测血清样品中的口蹄疫病毒A型抗体水平。

试剂盒组成

操作步骤与判定

1.操作步骤

1.1试剂准备：20X洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释成1X洗涤液（即1份20X洗涤液加入19份蒸馏水）。

1.2实验准备：取出包被板，记录好样本的位置。如需使用部分板条，则将需要的板条拆下进行实验，将剩余的板条置于2-8℃干燥保存。

1.3加样/对照：分别将5µl待检样品和阴、阳性对照加入到抗原包被板孔内，其中阴、阳性对照各加2孔；注意每个样品使用不同的吸头。

1.4加酶：每孔加入95ul酶标抗体，轻轻振荡混匀，封板后置于37℃温育30分钟。

1.5洗涤：弃去孔内液体，每孔加入300µl 1X洗涤液，洗涤4次，在最后一次1X洗涤液弃去后，将孔中残留的1X洗涤液拍干。

1.6显色：每孔先加入50µl底物A液，再加入50µl底物B液，轻轻振荡混匀，封板后置于37℃温育15分钟。

1.7终止：每孔加入50µl终止液，轻轻振荡混匀，测定OD450nm波长处各孔的吸光值。

2.判定

2.1实验成立条件：阴性对照OD_450nm平均值＞0.5；阳性对照S/N值＜30%。

如果实验结果不成立，有可能是实验操作失误造成的，应按操作步骤进行重复实验。

2.2 S/N值=

2.3结果判定：S/N值≤30%，判为阳性；S/N值≥40%，判为阴性；30%＜S/N值＜40%，判为可疑。可疑血清样品需要复检，复检抗体效价≥1：128，判为阳性；复检抗体效价＜1：128，判为阴性。

2.4 S/N值与抗体效价对应关系

3.注意事项

3.1试剂盒严禁冻结，试剂盒从2-8℃冰箱中取出后需室温放置30分钟以上，完全恢复至室温方可使用，使用后应立即密封放置2-8℃保存。

3.2使用前需确认试剂盒有效期，应在有效期内使用。

3.3所有试剂严禁接触皮肤和粘膜，检测结束后所用耗材按国家规定进行无害化处理。

3.4底物B溶液变蓝，则不能使用。

3.5每个血清样品1个吸头，避免交叉污染。

3.6待检血清样品数量较多时，应尽量缩短加样时间。

3.7终止反应后应立即用酶标仪读数，应在10分钟内完成。

3.8所有样品、洗涤液和各种废弃物都应灭活处理。

3.9严格按照实验操作步骤操作。

3.10仅用于科研或遵守当地法律法规。

规格

1*96T/盒，2*96T/盒，5*96T/盒

贮藏条件及有效期

2～8℃保存，有效期为12个月。