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牛病毒性腹泻 1/2 型单克隆抗体(2H1 细胞株);牛病毒性腹泻1型抗体;牛病毒性腹泻2型抗体

发布人:费雪(杭州)医学研究有限公司

发布日期:2025/12/20 22:22:25

一、基本特性与制备背景

2H1 细胞株是通过杂交瘤技术制备的鼠源性单克隆抗体,特异性识别牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 1 型和 2 型的特定抗原表位。该抗体通过纯化的 BVDV 全病毒或重组蛋白(如 E2、Erns)免疫 BALB/c 小鼠,经细胞融合、多次亚克隆筛选获得,能稳定分泌高亲和力抗体。
核心参数

二、抗原靶点分析

BVDV 是黄病毒科瘟病毒属的单股正链 RNA 病毒,其主要抗原靶点包括:
靶点蛋白特性与功能2H1 株可能的结合位点
E2 蛋白 (gp53/gp55)
病毒主要表面糖蛋白,介导病毒与宿主细胞受体结合,是主要中和抗原
可能识别 E2 蛋白的中和表位区 (COE) 或受体结合域 (RBD)
Erns 蛋白
病毒表面糖蛋白,具有 RNA 酶活性,参与病毒吸附和免疫逃逸
可能识别其保守区域,适用于病毒检测
N 蛋白
核衣壳蛋白,参与病毒基因组包装,具良好免疫原性
可能识别其保守区域,用于病毒检测

三、核心应用场景

1. 双抗体夹心 ELISA(BVDV 抗原定量检测)

原理:2H1 株作为包被抗体捕获样本中 BVDV 抗原,搭配 HRP 标记的配对抗体(如识别不同表位的另一株单抗)形成 "抗体 - BVDV - 标记抗体" 夹心结构,通过显色强度定量抗原含量。
应用价值

2. 胶体金免疫层析试纸条(现场快速筛查)

应用场景
构建要点

3. 免疫荧光与免疫组化(病毒定位)

应用价值

4. Western Blot(蛋白验证)

应用

5. 病毒中和试验(VN)

应用

四、检测体系构建指南

双抗体夹心 ELISA 标准流程(以 2H1 为包被抗体):

plaintext
1. 包被:2H1抗体(1μg/mL碳酸盐缓冲液)100μL/孔,4℃过夜
2. 封闭:5%脱脂奶粉/PBS,200μL/孔,37℃ 1h,PBST洗3次
3. 加样:待检样本(血清1:100稀释,组织匀浆1:20稀释)100μL/孔,37℃ 1h,PBST洗3次
4. 加检测抗体:HRP标记的配对抗体(如7F9株,0.1μg/mL)100μL/孔,37℃ 30min,PBST洗5次
5. 显色:TMB底物100μL/孔,避光37℃ 10-15min
6. 终止:2M H₂SO₄ 50μL/孔,测450nm OD值

配对抗体选择原则:

五、使用与保存注意事项

抗体保存:

样本处理要点:

应用限制:


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