2H1 细胞株是通过杂交瘤技术制备的鼠源性单克隆抗体,特异性识别牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 1 型和 2 型的特定抗原表位。该抗体通过纯化的 BVDV 全病毒或重组蛋白(如 E2、Erns)免疫 BALB/c 小鼠,经细胞融合、多次亚克隆筛选获得,能稳定分泌高亲和力抗体。
核心参数:
抗体类型:鼠源 IgG(亚型通常为 IgG1 或 IgG2a),轻链为 κ 型
特异性:能识别 BVDV-1 和 BVDV-2,与其他瘟病毒(如猪瘟病毒)无交叉反应
效价:腹水抗体效价≥1:10⁵,细胞培养上清效价≥1:1000
稳定性:细胞株传代至 40 代以上仍保持稳定分泌抗体能力
BVDV 是黄病毒科瘟病毒属的单股正链 RNA 病毒,其主要抗原靶点包括:
原理:2H1 株作为包被抗体捕获样本中 BVDV 抗原,搭配 HRP 标记的配对抗体(如识别不同表位的另一株单抗)形成 "抗体 - BVDV - 标记抗体" 夹心结构,通过显色强度定量抗原含量。
应用价值:
应用场景:
构建要点:
T 线:2H1 抗体包被(浓度 2-4mg/mL)
C 线:羊抗鼠 IgG 包被(浓度 4mg/mL)
胶体金标记:选用与 2H1 株配对的抗体(识别不同表位)
应用价值:
应用:
应用:
评估 BVDV 阳性血清的中和活性
疫苗免疫效果评价
病毒株毒力和抗原性分析
1. 包被:2H1抗体(1μg/mL碳酸盐缓冲液)100μL/孔,4℃过夜
2. 封闭:5%脱脂奶粉/PBS,200μL/孔,37℃ 1h,PBST洗3次
3. 加样:待检样本(血清1:100稀释,组织匀浆1:20稀释)100μL/孔,37℃ 1h,PBST洗3次
4. 加检测抗体:HRP标记的配对抗体(如7F9株,0.1μg/mL)100μL/孔,37℃ 30min,PBST洗5次
5. 显色:TMB底物100μL/孔,避光37℃ 10-15min
6. 终止:2M H₂SO₄ 50μL/孔,测450nm OD值
血清 / 血浆:56℃灭活 30min,12000rpm 离心 5min 去除脂蛋白
组织样本:加入含蛋白酶抑制剂的组织裂解液,匀浆后 12000rpm 离心 15min 取上清
粪便样本:加入含 0.1% Triton X-100 的 PBS,4℃静置 1h,12000rpm 离心 10min 取上清