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非洲猪瘟抗体;非洲猪瘟病毒P30抗体;非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体;ASFV-P30抗体

发布人:费雪(杭州)医学研究有限公司

发布日期:2026/1/2 22:21:46

非洲猪瘟病毒(ASFV)P30 蛋白抗体

ASFV P30 蛋白抗体是针对非洲猪瘟病毒 P30 蛋白(CP204L 基因编码) 的特异性免疫球蛋白,是 ASFV快速诊断、抗原检测、病毒鉴定的黄金核心试剂,也是科研 / 生产中最常用的 ASFV 抗体靶点,优先级远超 P54/P72 抗体(适配基层检测 + 精准分型),以下是全维度专业内容,适配试剂研发、临床检测、实验室质控场景。

先明确核心:ASFV P30 蛋白(抗体靶点)基础参数

P30 蛋白是 ASFV衣壳结构蛋白,是抗体的靶向抗原,其分子特性直接决定抗体的活性与应用,核心参数必须牢记:编码基因:CP204L 基因(唯一编码基因,无亚型差异),全长 612 bp,编码 204 个氨基酸;分子量:天然 / 重组 P30 蛋白均为30 kDa(无糖基化,ASFV 无囊膜,蛋白均为非糖基化,真核 / 原核表达分子量一致);保守性:跨毒株 100% 保守(包括流行株 Georgia/2007、CN/GS/2018、CN/HLJ/2018),无氨基酸突变,是通用抗原靶点; 免疫原性:极强,感染 / 免疫后机体最先产生 P30 抗体(感染后 3-5 天即可检出),抗体持续期≥6 个月; 亚细胞定位:病毒衣壳外层,参与病毒吸附宿主细胞,是 ASFV 早期感染的标志性蛋白。  核心优势:P30 蛋白无变异、保守性满分,因此 P30 抗体无毒株特异性,适配全球所有 ASFV 毒株检测,是通用型抗体首选。

 ASFV P30 蛋白抗体 核心分类(选型核心,按用途分)

P30 蛋白抗体按制备方式、种属来源、功能用途分 3 大类,是研发 / 检测选型的关键,行业主流为鼠源单克隆抗体 + 兔源多克隆抗体,核心参数 + 适配场景精准区分:

▶ 按制备方式分(最核心分类,决定应用场景)

抗体类型核心参数优势劣势效价标准(行业)核心适配场景单克隆抗体(mAb)鼠源为主(Balb/c),IgG1/IgG2a 亚型,纯度≥98%特异性 100%、批间差极小、可无限量产、适配定量检测制备成本高、仅识别单一表位ELISA 效价≥1:10⁶,WB 效价≥1:10⁵胶体金试纸、ELISA 试剂盒、化学发光试剂(核心配对抗体)多克隆抗体(pAb)兔源 / 猪源为主,多亚型混合,纯度≥95%识别多表位、灵敏度极高、制备成本低、适配定性检测批间差略大、偶有轻微非特异ELISA 效价≥1:10⁵,WB 效价≥1:10⁴免疫印迹(WB)、免疫荧光(IFA)、抗原纯化捕获

 按功能用途分(实操直接选型)

捕获抗体:优选鼠源 IgG2a 型 P30 单抗,亲和力≥10⁻⁹ M,适配 ELISA / 胶体金包被固相载体,捕获样本中 P30 抗原; 检测抗体:优选兔源多抗 / 标记型单抗(HRP/FITC/ 胶体金标记),适配抗原检测的信号放大,灵敏度≤0.1 ng/mL; 鉴定抗体:优选荧光标记 P30 单抗,适配 IFA / 激光共聚焦,定位病毒在细胞内的分布; 中和抗体:仅猪源 P30 多抗具备弱中和活性,适配病毒体外中和试验,科研专用(临床无中和应用)。

 主流种属来源(行业标配,避坑非适配种属)

 鼠源 P30 单抗:行业第一首选,无交叉反应、活性稳定,适配所有检测平台,占市场 90% 以上份额; 兔源 P30 多抗:次选,灵敏度互补,适配 WB/IFA,与鼠源单抗搭配实现单抗捕获 + 多抗检测的黄金配对; 猪源 P30 抗体:仅适配血清学检测(检测猪体内 P30 抗体),科研专用,临床极少用; 避坑:羊源 / 鸡源 P30 抗体,活性低、非特异强,无行业应用价值,不推荐选用。

 P30 蛋白抗体 核心关键特性(检测 / 研发必验指标,行业标准)

合格的 ASFV P30 抗体必须满足以下硬性指标,否则会导致检测假阳 / 假阴,是试剂质控的核心,均为行业药典 / 国标要求:

 特异性(核心指标,零容忍交叉)

 与猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝耳病毒(PRRSV) 等猪源常见病毒无任何交叉反应; 仅特异性结合 ASFV P30 蛋白,不结合 ASFV P54/P72/P17 等其他 ASFV 蛋白(单抗特性),多抗可结合 P30 全表位; 样本中猪血清、组织匀浆、粪便等基质无干扰,基质效应<5%。

 灵敏度(检测下限,决定检出能力)

 单抗配对 ELISA:检测下限≤0.1 ng/mL 重组 P30 抗原,可检出 10² TCID₅₀的 ASFV 活病毒; 胶体金试纸(P30 抗体):检测下限≤1 ng/mL 抗原,适配临床猪全血 / 组织快速检测; WB 检测:可检出 10 ng 的重组 P30 蛋白,条带清晰无杂带。

 稳定性与效价(生产 / 储存核心)

 效价标准:ELISA 效价 **≥1:10⁶(单抗)/≥1:10⁵(多抗)**,WB 效价≥1:10⁴; 储存稳定性:4℃保存≥6 个月,-20℃冻存≥24 个月,反复冻融 3 次效价无衰减; 工作条件:室温(25℃)下孵育 15-30 分钟即可完成结合,适配基层快速检测。

 其他质控指标(行业强制要求)

纯度:单抗≥98%,多抗≥95%(SDS-PAGE 电泳无杂带);内毒素:≤0.1 EU/μg(兽用生物制品药典标准,避免动物免疫反应);无支原体 / 细菌污染,无菌检测合格。

ASFV P30 蛋白抗体 核心应用场景(实战价值,全行业覆盖)

P30 抗体是 ASFV 防控中应用最广、性价比最高的抗体,覆盖临床检测、试剂研发、科研实验、生产质控全场景,远超 P54/P72 抗体的应用范围,核心场景如下:

临床快速诊断(最主流用途,基层猪场必备)

  1. 胶体金免疫层析试纸:以鼠源 P30 单抗为捕获抗体,兔源 P30 多抗为检测抗体,适配猪全血、口鼻拭子、淋巴结组织检测,15 分钟出结果,灵敏度≥99%,特异性≥100%,是基层 ASFV 快速筛查的金标准;

  2. 现场 ELISA 试剂盒:P30 单抗包被微孔板,检测样本中 P30 抗原,适配养殖场 / 动检站批量检测,可定量判断病毒载量。

实验室精准检测(科研 / 疾控中心专用)

  1. 免疫印迹(WB):兔源 P30 多抗适配 ASFV 病毒蛋白鉴定,可精准识别 30 kDa 的 P30 蛋白条带,用于病毒分离株的确认;

  2. 免疫荧光试验(IFA):荧光素(FITC/Cy3)标记 P30 单抗,染色感染 ASFV 的 PK-15 细胞,细胞质出现特异性荧光,用于病毒定位 / 滴度测定;

  3. 化学发光 / 荧光定量 ELISA:P30 单抗配对,实现 ASFV 抗原定量检测,检测下限≤0.05 ng/mL,适配疾控中心溯源分析。

 科研核心应用(实验室基础研究)

  1. P30 抗原纯化:用 P30 单抗制备亲和层析柱,可从 ASFV 病毒液 / 重组表达菌中纯化99% 纯度的 P30 蛋白,用于抗原标准品制备;

  2. 病毒侵染机制研究:P30 抗体可阻断 P30 蛋白与宿主细胞受体(CD163)结合,抑制病毒吸附,用于 ASFV 侵染通路研究;

  3. 毒株分型验证:因 P30 蛋白 100% 保守,P30 抗体可验证所有 ASFV 毒株的阳性,无需区分亚型。

生产质控(生物制品 / 试剂生产专用)

  1. 重组 P30 抗原质控:用 P30 抗体检测重组 P30 蛋白的纯度、活性,确保诊断试剂的抗原原料合格;

  2. 疫苗原料筛查:ASFV 无商品化疫苗,但研发中用 P30 抗体检测疫苗原料是否污染 ASFV,规避生物安全风险;

  3. 试剂批间一致性验证:用 P30 标准抗体校准各批次检测试剂,保证批间差≤3%。

 核心避坑:P30/P54/P72 抗体 关键区分(最易混淆,必须明确)

ASFV 核心抗体有 P30/P54/P72 三种,功能 / 应用天差地别,90% 的专业人员会混淆,精准选型是检测成功的关键,表格清晰区分: 抗体类型靶向蛋白保守性核心优势检测灵敏度核心应用场景优先级P30 抗体CP204L✅100%通用、早期检出、适配快速检测★★★★★胶体金 / ELISA 快速诊断、基层筛查✅首选P54 抗体E183L✅99%病毒复制期检出、适配定量★★★★☆荧光定量检测、病毒载量分析次选P72 抗体B646L✅98%病毒衣壳核心、适配核酸联检★★★☆☆电镜鉴定、毒株分型、核酸配套备选

 选型结论:

 基层快速筛查 / 临床诊断:必选 P30 抗体(唯一首选);实验室定量 / 溯源:P30 抗体 + P54 抗体联用;毒株分型 / 病毒鉴定:P30 抗体 + P72 抗体联用。

关键使用 & 保存注意事项(延长抗体寿命,避免活性损失)

  1. 储存条件:未开封抗体 **-20℃分装冻存 **(避免反复冻融,分装为 50/100 μL 小管),开封后 4℃保存,1 个月内用完;

  2. 稀释液:必须用PBST(含 1% BSA) 稀释,禁止用纯水 / 生理盐水,避免抗体变性;

  3. 孵育条件:ELISA / 胶体金孵育温度 25-37℃,时间 15-30 分钟,避免低温 / 过长孵育导致非特异;

  4. 交叉污染防控:P30 抗体为生物安全试剂,操作区需与猪瘟 / 伪狂犬试剂分区,避免气溶胶污染。


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