12G10 株抗体是通过杂交瘤技术制备的鼠源性单克隆抗体，特异性识别猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) 的特定抗原表位。该抗体通过 TGEV 全病毒或重组蛋白 (如 S 蛋白 / S1 亚基或 N 蛋白) 免疫 BALB/c 小鼠，经细胞融合、多次亚克隆筛选获得，能稳定分泌高亲和力抗体。
核心参数：
抗体类型：鼠源 IgG (亚型多为 IgG1 或 IgG2a)，轻链为 κ 型
特异性：仅识别 TGEV，与猪流行性腹泻病毒 (PEDV)、猪轮状病毒 (PRV) 等无交叉反应
抗原靶点：主要识别 TGEV 的 S 蛋白 (刺突蛋白) 或 N 蛋白 (核衣壳蛋白)，两者均为病毒的主要结构蛋白和免疫原性蛋白
效价：腹水抗体效价可达 1:10⁵以上，细胞培养上清效价≥1:1000
TGEV 作为冠状病毒科成员，其表面 S 蛋白是介导病毒与宿主细胞 (猪小肠上皮细胞) 受体 (氨肽酶 N) 结合的关键蛋白，也是主要中和抗原；N 蛋白则参与病毒基因组包装，具有良好的免疫原性和保守性。
12G10 株可能的抗原表位：
原理：12G10 株作为包被抗体捕获样本中 TGEV 抗原，搭配 HRP 标记的配对抗体 (如识别不同表位的另一株单抗) 形成 "包被抗体 - TGEV - 标记抗体" 夹心结构，通过显色强度定量抗原含量。
应用价值：
应用场景：基层猪场、屠宰场的 TGEV 现场快速检测 (15 分钟内出结果)，适用于大批量样本初筛
构建要点：
T 线：12G10 抗体包被 (浓度 2-4mg/mL)
C 线：羊抗鼠 IgG 包被 (浓度 4mg/mL)
胶体金标记：选用与 12G10 株配对的抗体 (如识别不同表位的单抗)
应用价值：
应用：
1. 包被：12G10抗体(1μg/mL碳酸盐缓冲液)100μL/孔，4℃过夜
2. 封闭：5%脱脂奶粉/PBS，200μL/孔，37℃ 1h，PBST洗3次
3. 加样：待检样本(粪便1:20稀释，肠组织匀浆1:10稀释)100μL/孔，37℃ 1h，PBST洗3次
4. 加检测抗体：HRP标记的配对抗体(如7F9株，0.1μg/mL)100μL/孔，37℃ 30min，PBST洗5次
5. 显色：TMB底物100μL/孔，避光37℃ 10-15min
6. 终止：2M H₂SO₄ 50μL/孔，测450nm OD值
粪便样本：加入含 0.1% Triton X-100 的 PBS 充分混匀，4℃静置 1h，12000rpm 离心 10min 取上清
肠组织：剪碎后加入组织裂解液 (含蛋白酶抑制剂)，匀浆后 12000rpm 离心 15min 取上清
血清样本：56℃灭活 30min，8000rpm 离心 5min 去除脂蛋白
12G10 株抗体作为 TGEV 检测与研究的核心工具，具有特异性强、亲和力高、稳定性好等优势，在以下方面发挥关键作用：
疫病诊断：建立高灵敏度、特异性的 TGEV 检测方法，助力猪场疫病防控
科研研究：揭示 TGEV 感染机制、病毒 - 宿主相互作用及致病机理
疫苗研发：用于疫苗抗原含量测定和免疫原性评估，提高疫苗质量控制水平
