发布人:上海晶抗生物工程有限公司
发布日期:2020/6/16 8:49:56
设计ELISA复孔检查时,是对同一个样品作两次稀释,再别离加到板上的两个孔,仍是只稀释一次,然后吸取两次别离加到两个孔?前者似乎把稀释时的差错也考虑到了,但做出来的成果两个孔相关挺大的。而较常运用的是哪种稀释方法?
为了减小差错,是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问,我公司技术人员是这样解说的:
1. 前者测的是稀释和移液的差错,后者只有移液差错。
2. 一般都是稀释一次,分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由所以从同一原液稀释,一般不考虑稀释差错(稀释差错是存在的),都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释,这样可以使稀释差错减小)。
4. 复孔是为了排除移液体积,板的影响,以及其他系统差错的,要求复孔的浓度是共同的。稀释后分孔能满意此要求,逐个稀释不能。
ELISA操作技巧
1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等,要先检查水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。
2.正确运用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反响孔壁上,加样器吸头要清洗洁净,避免污染,加样次序要与说明书共同,否则可导致成果错误,试验重复性差。
3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗刷次数不要超越说明书引荐的洗刷次数,洗液在反响孑L内停留的时刻不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,形成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
4.要确保加液量共同 咱们在运用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量禁绝,形成显色不统一,判别错误。
5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反响,显色液量不能过多,以免显色过强。
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