发布人:上海晶抗生物工程有限公司
发布日期:2020/3/6 15:26:17
在操作ELISA试剂盒实验前,不少教师会找寻许多的相关实验资料,网上的资料一大堆,但是真实所能够需求用到的技巧和留心也就那几条,熟练的了解并掌握之后再应用到实验中就会简略的多。做好这几条,ELISA试剂盒实验高手不是梦。
一、加样的经验总结
加样或加试剂时,请留心在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,个孔与一个孔加样之间的时间间隔假如太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,然后明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内,如标本数量多,举荐运用多道移液器加样。
二、孵育的三条必知
1.为避免样品蒸发,实验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标 板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;
2.洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状况;
3.一起应严格遵守给定的孵育时间和温度。
三、ELISA洗刷小技巧
洗刷过程中反应孔中残留的洗刷液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水,一起要消除板底残留的液体和手指印,避免影响*后的酶标仪读数。
四、反应时间的控制
参加底物后请守时查询反应孔的颜色改变(比如,每隔 10分钟),如颜色较深,请提前参加中止液中止反应,避免反应过强然后影响酶标仪光密度读数。
五、ELISA试剂盒操作说明
1.封板膜只做一次性运用。
2.标本中待测物质含量过高时先将样本稀释必定倍数后再测定,核算时请乘以稀释倍数。
3.各步加样均运用加样器,并常常校正其正确性,一次加样时间控制在5分钟内(标本数目多的时分,上海研域举荐运用排枪加样)。
4.液体标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应逾越1个月,-80℃不应逾越2个月;标本溶血会影响检测成果,因而溶血标本不宜进行此项检测。
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