糖蛋白的分离与纯化

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2024/12/25 12:35:33

蛋白质可分为单纯蛋白质和缀合蛋白质，单纯蛋白质仅由氨基酸组成，不含其他化学成分：许多其他蛋白质含有除氨基酸以外的化学成分作为其结构的一部分，这样的蛋白质称为缀合蛋白质。缀合蛋白质可以按其非氨基酸成分分为糖蛋白，脂蛋白，核蛋白，磷蛋白，金属蛋白，血红素蛋白，黄素蛋白等。

根据糖肽类的类型，蛋白质糖基化可以分为四类：

以丝氨酸，苏氨酸，羟赖氨酸和羟脯氨酸的羟基为连接点，形成-o-糖苷键型。
以天冬酰胺的，N-端氨基酸的a-氨基以及赖氨酸或精氨酸的ω-氨基为连接点，形成-N-糖苷键型。
以天冬氨酸或谷氨酸的游离羧基为连接点，形成脂糖苷键型。
以半胱氨酸为连接点的糖苷健。

糖基化蛋白的分离纯化
获得糖基化蛋白的主要方法是电泳法和层析法。

电泳法即是通过电泳的方法先得到糖蛋白条带或蛋白点，再通过电洗脱或透析的方法得到糖蛋白。（此方法较为费时，且在操作中易使蛋白质变性）

层析法快捷，准确，分辨率高，稳定性好，是分析糖蛋白的理想手段。

近些年来，硼酸亲和技术在糖蛋白/糖肽富集领域得到了快速的发展，其独特的亲和性引起了研究工作者极大的关注。由于硼酸基于与顺式二醇基团可发生可控的可逆共价键合反应，后者在糖蛋白的糖链结构中广泛存在，因而硼酸亲和技术常被用做是一种选择性富集分离顺式二醇化合物的有效提纯手段。硼酸亲和作用的工作原理如图：

与其他的富集方法相比，硼酸亲和技术具有以下几个特点：

1.硼酸亲和技术是一种广谱性的亲和技术，硼酸配给几乎可以与素有含有顺式二醇结构的化合物发生亲和作用；

2.硼酸亲和技术对目标分子的富集分离的条件可以将非特异性吸附作用力抑制或消除，从而保证对了对目标分子的高专一性；

3.硼酸亲和技术中，结合/释放目标分子的实验操作简易方便，可以通过简单地调节环境的Ph来实现；

4.酸性条件下硼酸基配基释放目标分子的动力学过程具有快的速率，有利于消除样品的拖尾现象；

5.在硼酸亲和技术中，由于用于解吸的流动相常是酸性水溶液，洗脱条件与质谱条件能够吻合，可以方便地实现硼酸亲和技术和质朴检测技术的在线或离线联用，快速分离。

Astrea苯基硼酸酯琼脂糖亲和层析填料
Astrea氨基苯基硼酸酯琼脂糖亲和填料特别适合于纯化糖基化蛋白，或从未糖化的的蛋白中去除糖蛋白和碳水化合物杂质。也可以用于去除某些酶，如其中硼酸基团与活性部位有亲和力的蛋白酶和水解酶。

化学稳定的亲和配体与6%的交联琼脂糖珠结合，琼脂糖基球颗粒度均一性好（接近单分散颗粒），抗压性强，选择性更高。

产品特征
适用于糖蛋白的纯化和去除。
高纯度间-氨基苯硼酸配体。
配体通过顺式二醇选择性地与碳水化合物基团结合。
高动态载量。
抗压性强，填料寿命非常长久。
可耐受0.5 M NaOH，易于清洗，消毒及再生。
根据ISO9001标准生产，批次间重复性高。
提供全面的法规支持文件（RSF）及档案。

产品优势
1.提供两种两种产品满足不同的实验需求
Aminophenylboronate产品有两种，Aminophenylboronate P6XL采用Astrea特有的Purabead®P6XL Purabead® P6XL生产，均一性好（接近单分散颗粒）抗压性强，选择性高。AminophenylboronateA6XL是Astrea的早期的产品，具有更宽的颗粒尺寸。更适合研发和体外诊断原料生产。

2.高PH稳定性
我们的氨基苯基硼酸盐吸附剂，在PH值范围3-13(连续曝光)，兼容间歇性暴露于PH 14.0。