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ε-氨基特定赖氨酸残基的乙酰化是核心组蛋白中Z可靠的表观遗传标记之一，对于调节多种细胞过程至关重要。组蛋白乙酰转移酶（HATs）催化的组蛋白乙酰化似乎特别重要，因为它与基因组的活性区域相关联。相比之下，组蛋白去乙酰化酶（HDACs）催化的组蛋白去乙酰化导致转录抑制。到目前为止，至少已经鉴定出4类HDACs。I类HDACs包括1、2、3和8。II类HDACs包括4、5、6、7、9和10。III类酶，即sirtuins，需要NAD+辅因子，包括SIRTs 1-7。IV类酶只包含HDAC11，具有I类和II类的特征。图1. HATs和HDACs催化的组蛋白乙酰化和去乙酰化

HDACs紧密参与细胞周期调控、细胞增殖以及人类疾病的发展，包括癌症、心血管疾病和肺部疾病以及神经系统疾病。例如，在各种肿瘤细胞中，发现HDAC酶过度表达。在慢性阻塞性肺病（COPD）中，观察到HDACs减少。在亨廷顿病中，HDAC4显著参与其中。检测HDACs的活性和抑制对于阐明表观遗传调控基因激活和沉默的机制，以及促进癌症诊断和治疗具有重要意义。

检测HDAC活性/抑制的方法只有几种。这些方法基于通过赖氨酸内肽酶或胰蛋白酶测量去乙酰化的组蛋白裂解，存在显著的弱点：(1) 由于来自提取物的赖氨酸内肽酶的干扰，不能使用细胞/组织的核提取物；(2) 胰蛋白酶敏感的HDAC抑制剂不适合用这些方法测试，因为当化合物库中存在胰蛋白酶抑制剂时，胰蛋白酶消化可能导致假阳性；(3) 酶溶液或测试化合物溶剂中常见的DMSO和含巯基化学物质的高干扰；(4) 直接测量HDAC转化的去乙酰化产物的准确性较低。这些问题通过EpigenTek早期的EpiQuik™ HDAC活性/抑制检测试剂盒避免了，这是一种流行的HDAC活性和抑制检测方法。

艾美捷 HDAC Activity试剂盒（P-4034）：HDAC活性/抑制直接检测试剂盒（比色法）是其前身的进一步改进——这种Z新方法保留了前一版本中的简单性、快速性、高通量能力和非放射性，同时提供了以下优势：

1、改进的试剂盒组成使背景信号非常低，这使得检测更准确、敏感、可靠和一致。

2、创新的比色检测方法通过直接检测HDAC转化的去乙酰化产物来测量HDAC活性/抑制，而不是基于胰蛋白酶的肽裂解，从而消除了由DMSO、含巯基化学物质、胰蛋白酶和细胞赖氨酸内肽酶引起的检测干扰。

3、可以使用细胞/组织提取物和纯化的HDAC酶，这允许检测HDAC抑制剂在体内和体外的抑制效果。

4、新颖的检测原理实现了高灵敏度。可以从低至0.5纳克的纯化HDAC酶中检测到活性，这比通过基于胰蛋白酶的肽裂解检测方法获得的灵敏度高出约10倍。

5、包含去乙酰化组蛋白标准品，允许定量HDACs的特异性活性。

6、曲古菌素A（TSA），一种强效的I类和II类HDAC活性抑制剂，作为HDAC抑制的阳性对照。

7、条形孔微孔板格式使检测灵活快速：手动或高通量分析可在3.5小时内完成。

HDAC Activity试剂盒：组蛋白去乙酰化酶HDAC活性/抑制直接分析试剂盒检测原理：
Epigenase™HDAC活性/抑制检测试剂盒包含测量HDAC活性或抑制所需的所有试剂。在该测定中，乙酰化组蛋白HDAC底物被稳定地固定在微孔板孔上。活性HDACs与底物结合，并从底物中去除乙酰基。HDAC脱乙酰产物可以用特异性抗体识别。然后，通过在450nm处读取微孔板分光光度计的吸光度，可以用比色法测量与酶活性成比例的脱乙酰基产物的比例。HDAC酶的活性与测量的OD强度成正比。

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https://www.amyjet.com/products/P-4034-48.shtml