上海泰坦科技股份有限公司

2024年5月，上海泰坦科技股份有限公司（以下简称“泰坦科技”）正式成为瑞普利金（上海）生物科技有限公司（以下简称“瑞普利金”）透析薄膜业务在全国科研领域总经销。

作为实验室透析产品的开创者和技术领导者，瑞普利金提供多样的透析膜选择，以满足实验室研究者不断变化的需求。如何选择透析膜？请查收这份指南！

透析原理

透析是指溶质在浓度梯度的驱使下，通过半透膜选择性扩散，从而达到大/小分子分离，膜两侧浓度平衡。如果将样品置于透析膜管内，通过置换膜管外部的透析缓冲液，可将小颗粒物质清除，从而达到纯化大分子物质的目的。一般来说，一天之内置换3~5次缓冲液，然后在室温条件下，放在搅拌台上隔夜透析，即可达到高效的透析结果。

标准的透析操作一般需要16~24小时。许多因素会影响透析效率，包括扩散系数、pH值、温度、时间、物质浓度、样品体积、透析缓冲液体积、透析缓冲液的置换次数、膜表面积、膜厚度、分子带电荷及缓冲液搅拌速率。

选择“正确的膜”

透析成功进行的关键是在适当的条件下选用最合适的膜，可根据以下6个步骤进行选择：

• 根据应用需求，选择透析膜级别：生物技术级或标准级。

• 根据溶液化学性质，选择透析膜类型：纤维素酯（CE）或再生纤维素（RC）。

• 根据应用需求，选择合适的透析膜结构：卷式（管状）膜、一次性即用型透析装置或圆形、方形平面膜。

• 根据溶质分子量，选择合适的膜截留分子量（MWCO）。

• 根据透析液处理量选择：卷式（管状）膜选择扁平宽度；即用型透析装置选择容量。

• 根据应用需求，选择合适的膜处理方式：干式、湿式。

标准级与生物技术级对比

透析袋宽度选择

透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快，较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。简单来说，透析的样品越多，需要选择的透析袋宽度越大，反之亦然。透析袋直径和宽度的关系可参考下图： 

透析袋分子量选择

透析膜微观下呈海绵状结构，代表膜孔径的截留分子量（MWCO）是一个间接衡量膜分离性能的参数。更准确的说，膜的截留分子量可定义为截留率至为少95%的溶质的分子量。

由于溶质的渗透特性取决于分子形状、水合化程度、离子电荷和极性，我们建议选择透析袋分子量是被截留物质的分子量的一半以下，或是将要透出的物质的最大分子量的两倍以上。

透析液选择

生物分子需在适当的pH范围内保存。一般的透析缓冲液pH范围为6~8。以下为常用的缓冲液：水、PBS、TBS、HEPES、氨基酸缓冲液。

透析缓冲液的体积越大，小分子扩散的驱动力越大。我们一般推荐缓冲液和样品的体积比为100：1。当扩散速率降低，膜两侧溶液趋于平衡时，通过置换缓冲液，可维持小分子扩散驱动力和透析速率

一般推荐在12~24小时内，置换缓冲液2到3次，每次缓冲液置换，可将溶质浓度降低十分之一具体安排如下：

• 第一次缓冲液置换：透析开始后2~3小时。

• 第二次缓冲液置换：透析开始后4~5小时。

• 最后一次缓冲液置换：透析隔夜之前。

对于盐浓度较高的样品，推荐使用低盐浓度的缓冲液。不推荐直接使用纯水作为缓冲液，因为渗透压力可能将水引入膜管，使样品体积膨胀并可能导致膜管破裂。使用一系列浓度逐渐降低的溶液作为缓冲液可防止渗透压力导致的膜管膨胀。

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