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色原底物HDAOS与TMB试剂的区别色原底物

发布人:武汉迪福生物技术有限公司

发布日期:2024/5/22 8:14:30

 

HDAOS是生化试剂盒中常用的显色试剂,同样TMB也是应用普遍的显色试剂,那么这两种试剂作为显色试剂哪个更好呢?其实两种不存在哪个好,主要是应用上有一些区别,选择合适的显色试剂即可。

HDAOS的物化性质

HDAOS是新型Trinders试剂中的一种,CAS号:82692-88-4,全称N-(2-羟基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺钠盐。HDAOS在过氧化物酶存在的情况下,可以与4-AAP耦联被过氧化氢氧化,该反应非常灵敏。所以HDAOS通常被用于有过氧化物酶参与或H2O2参与的生化检测中,比如血清总胆固醇的检测、血脂检测等。

TMB试剂的物化性质

它是一种用于ELISA试剂盒中的一种色原底物,应用很普遍。TMB,即3,3,5,5-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)的最常用底物之一。在辣根过氧化物酶或其它适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物,该蓝色产物通常可以在370nm620-650nm测定吸光度。由于辣根过氧化物酶与TMB的反应在一定时间内能持续进行,若不及时终止反应,可能会由于反应达到平台期等而影响实验结果。

HDAOS试剂的优势

生化检测中应用的色原底物很多,HDAOS是一种酶分析法,灵敏度很高,需要的设备简单。比如普遍采用色原底物HDAOS的酶法测定总胆固醇,其优点是快速准确、专一性强、样本用量少、不需抽提,便于自动化分析和批量测定(气相和高效液相色谱法条件要求高)。

HDAOS与过氧化氢反应时需要与4-AAP耦联,而TMB是不用的,不过HDAOS的显色产物吸收波长要远大于TMB的产物吸收波长,这样干扰会更少一些。目前我们生产的色原底物除了HDAOS之外,总共有是多种,比如ADPSTOPSDA64等等。

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