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Tris、Tris HCl、Bis-Tris的制备方法及使用注意事项

Tris（三羟甲基氨基甲烷）可用于包括TAE和TBE在内的各种缓冲溶液中。Tris也可以用于运行和加载缓冲剂，例如用于SDS-PAGE。其有效pH范围是7.0至9.0。Tris缓冲液的两种常见形式是Tris碱和Tris HCl。使用Tris HCl替代NaOH或HCl的其他优点包括安全性和可重复性。

如何制作Tris和Tris HCl及使用注意事项

Tris Base和Tris HCl的制备步骤：

Tris：要制备1升1M Tris缓冲液，请将121.14 g  Tris溶解在750 mL dH2O中。用浓盐酸调节至所需的pH。pH值可以通过增加Tris HCl（酸性增加）或Tris碱（碱性增加）的摩尔比来调节并使用Hendersen-Hasselbalch方程进行估算。用dH2O填充至终体积1L，并通过过滤器或高压釜灭菌。储存在4˚C。

Tris HCl：要制备1升1M Tris HCl缓冲液，请将157.60 g  Tris HCl溶解在750 mL dH2O中。使用10N氢氧化钠调节至所需的pH。您可以在1M Tris HCl Buffer方案中使用一张表。用dH2O填充至终体积1L，并通过过滤器或高压釜灭菌。储存在4˚C。

使用注意事项：

使用Tris溶液的一个技巧是溶液的pH值非常依赖于温度。因此，应在使用缓冲液的温度下制备Tris。此外，应避免使用含Tris缓冲液的含银的单结pH电极。

如何制作Bis-Tris及使用注意事项

Bis-Tris是Bis（2-羟乙基）胺缓冲液家族的成员。在压力变化的实验中，凝胶电泳实验中以及在阴离子交换色谱法和NMR期间，您可以使用这种缓冲液来抵抗pH的变化。该缓冲液的pH范围是5.8至7.2。

Bis-Tris制备步骤：

要制备1升1M Bis-Tris缓冲原液，请将209.24 g Bis-Tris溶解 在750 mL dH2O中。使用浓盐酸调节至所需的pH值。您可以在Bis-Tris PDF协议中使用表格。用dH2O填充至终体积1L，并通过过滤器或高压釜灭菌。将缓冲液存储在4摄氏度下。

注意事项：

当使用Bis-Tris缓冲溶液时，请记住Bis-Tris与铅，铜和其他各种金属形成络合物。除上述用途外，Bis-Tris可以替代作为有毒缓冲剂碳酸氢钙的安全替代品。