人肾实质细胞

人肾实质细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。 人肾实质细胞主要分离自人体的肾脏组织，特别是肾实质部分。肾实质是肾脏的主要功能区域，包括肾皮质和肾髓质两部分。肾实质内包含多种类型的细胞，如肾小球细胞、近端小管上皮细胞、远端小管上皮细胞等。在组织中的结构分布： 肾小球：位于肾小囊内，由毛细血管丛和肾小囊壁层上皮细胞构成。肾小球细胞主要参与血液的滤过功能，将血液中的废物和多余的水分形成原尿。 近端小管：连接肾小球和远端小管，负责重吸收原尿中的有用物质，如葡萄糖、氨基酸、离子等。近端小管上皮细胞具有高度的吸收和分泌功能。 远端小管：连接近端小管和集合管，对尿液进行最终的调节，包括尿液的浓缩和稀释功能。远端小管上皮细胞主要参与水、钠、钾等离子的转运和调节。 人肾实质细胞是肾脏的主要功能细胞，具有多种生物学特性和功能。它们主要负责滤过血液、重吸收有用物质、排泄代谢废物和多余的水分，以及维持水、电解质平衡和酸碱平衡。肾实质细胞的形态和结构复杂，具有高度的特异性和功能多样性。在生理条件下，人肾实质细胞保持正常的形态和功能，确保肾脏的正常运作。然而，在某些病理条件下，如肾炎、肾盂肾炎、肾结石等疾病中，肾实质细胞可能会受到损伤或破坏，导致肾脏功能异常。因此，对人肾实质细胞的研究对于深入了解肾脏疾病的发病机制和防治具有重要意义。

1.取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度

的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2.贴壁细胞消化

1）吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3）用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4）待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3.细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

成纤维细胞样 肾组织 人肾实质细胞采用胶原酶-胰蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。 贴壁