碘乙酸 N-羟基琥珀酰亚胺酯

SIA的臂长非常短，只有1.5 angstrom(Å)。SIA水溶性也不高，使用时一般需要DMSO、DMF等有机溶剂助溶。SIA通过与与巯基（Thiol, -SH）和胺基（Primary amine）来实现交联。
需注意的是：和马来酰亚胺（Maleimide）相比，碘乙酸（Iodoacetyl group）和巯基反应时的pH较高（pH > 7.5），反应速率也相对慢，对巯基的选择性也略差（在高pH条件下，碘乙酸也可和primary amino group or imidazole反应），但仍不失为一个有效的偶联官能团。 SIA Crosslinker 是一种不可降解 (non-cleavable) 的 ADC linker，可用于合成抗体偶联药物 (ADC)。

Non-cleavable

具有氨基和巯基反应性的双异官能团交联剂。典型情况下，最初通过pH7.5(6.5-8.5)缓冲条件下的酰胺键偶联到含有伯胺的分子上，接着通过pH7.5(7.0-8.0)缓冲条件下的硫醚链与含有自由巯基的分子进行特异性次级键合。用于制备酶免疫交联剂和半抗原载体分子偶联物。提供两个原子的连接基。

在0℃条件下，将N-羟基琥珀酰亚胺（12.6 mmol）和二环己基碳二亚胺（20.3 mmol）溶于适量溶剂中，随后加入碘乙酸（6 mmol）。将反应混合物逐渐升温至室温并持续搅拌4小时。对于化合物VIa的合成，需预先将马来酸酐（10 mmol）与β-丙氨酸在N,N-二甲基甲酰胺中反应1小时。反应完成后，通过减压蒸馏去除溶剂，粗产物用二氯甲烷溶解，并用水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，过滤后浓缩至干。残余物通过重结晶纯化，得到目标产物琥珀酰亚胺基碘乙酸酯（VIb），收率为30%。产物结构经1H NMR（CDCl3）和13C NMR（CDCl3）确认：1H NMR（CDCl3）δppm：2.87（2H，s），3.96（1H，s）; 13C NMR（CDCl3）δppm：-12.47（1C，s）25.85（2C，s）164.78（1C，s）168.78（2C，s）。

参考文献：

[1] Organic and Biomolecular Chemistry, 2016, vol. 14, # 32, p. 7777 - 7791

[2] Patent: US2013/273581, 2013, A1. Location in patent: Page/Page column 0092; 0111-0112; 0114

[3] Farmaco, 1992, vol. 47, # 11, p. 1367 - 1383