鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1

鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。 分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。 

UMNSAH/DF-1是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。 分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。 在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明这些细胞是永生化而没有转化。 这株细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质

取出15ml离心管，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

待鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 鸡 鸡胚 贴壁生长 成纤维细胞样 胚胎，自发永生化