大鼠垂体瘤细胞 用途与合成方法
大鼠垂体瘤细胞是由Tashjian·A·H等人于1965年7月从一只7月龄的雌性Wistar-Furth大鼠的垂体肿瘤中分离建立的。GH3细胞不是直接来源于GH1细胞的克隆,而是从原代培养的GH1细胞在大鼠身上传代两次形成的肿瘤中建立的。上皮细胞样的GH3细胞比GH1细胞分泌更高水平的生长激素,也可产生催乳素。对调控GH3细胞分泌蛋白类激素的研究表明,氢化可的松可以刺激GH3细胞生长激素的分泌、抑制催乳素的产生。 大鼠垂体瘤细胞源自大鼠垂体瘤,分泌泌乳素;表达功能性多巴胺受体。该细胞在免疫抑制的小鼠中不能成瘤,但在半固体培养基中可形成克隆。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备F12K培养基;优质胎牛血清,2.5%;HS,15%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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2021-08-20
大鼠垂体瘤细胞的应用