琥珀酸脱氢酶染色试剂盒(四唑盐法)

琥珀酸脱氢酶染色试剂盒(四唑盐法)主要由四氮唑蓝孵育液、阴性对照组成。染色后酶活性部位呈蓝色沉淀。

琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase，简称SDH），黄素酶类，属于细胞色素氧化酶，是TCA循环中唯一一个整合于膜上的多亚基酶，在真核生物中，结合于线粒体内膜，在原核生物中整合于细胞膜上，其是连接氧化磷酸化与电子传递的枢纽之一，可为真核细胞线粒体和多种原核细胞需氧和产能的呼吸链提供电子，为线粒体的一种标志酶。

1.接种细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1 000-10 000个细胞接种到96孔板，每孔体积200 ul。

2.培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。

3.呈色：培养3-5天后，每孔加MTT溶液（5 mg/ml用PBS配制，pH=7.4)20 ul，继续孵育4 h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150 ul DMSO，振荡10 min，使结晶物充分融解。

4.比色：选择490 nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。