酵母RNA提取试剂盒 用途与合成方法
本试剂盒适用于酵母RNA的提取,酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
酵母细胞经Lytic Enzyme处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
一般来说,酵母细胞样本量为2×108时,可提取的RNA量为30-100 μg,A260/A280的值在1.8-2.0之间,可满足下游实验应用。该产品可在50 min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度, 0D260/0D280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot 和各种酶切反应。
- 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
- 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 mL RLT中加入10 μL β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。
- 吸取使用量的缓冲液SE加入0.2% β-巯基乙醇备用
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2020-04-21
酵母RNA提取试剂盒