UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞)

贴壁；上皮细胞样 UMR-106细胞是注射放射性同位素磷(32P)诱导产生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立的细胞系，最初的肉瘤和克隆株都是由谢菲尔德大学的T.J.Martin开发的。UMR-106细胞对PTH、前列腺素及破骨甾体有响应，UMR-106细胞对PTH的响应度比细胞株UMR-108要高。蛋白激酶C的活化抑制ATP诱导的UMR-106细胞胞内钙水平的升高。UMR-106细胞可以用于3D细胞培养。 1） 来源：大鼠器官: 骨骼 品系: Sprague-Dawley 疾病: 骨肉瘤
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长 上皮细胞样(卵圆形、多角形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 注射放射性同位素磷(32P)诱导产生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立了UMR-106细胞株。细胞对PTH，前列腺素及破骨甾体有响应。对PTH的响应度，UMR-106比相关细胞株UMR-108要高。蛋白激酶C的活化抑制ATP诱导的胞内钙水平的升高。起始骨肉瘤和克隆株都是University of Sheffield的T.J. Martin建立的。 骨肉瘤；Sprague Dawley；成年 应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。 贴壁细胞 UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力zui好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。 1.取出小鼠后沥干酒精，放入超净台内，固定在泡沫板上。 2.用镊子提起皮肤，用解剖剪剪开皮肤一个横切口，将皮肤向上撕开，然后剪开肌肉等，暴露出腹腔，在左侧找到脾脏，用弯头眼科镊取出脾脏，置于无菌培养皿中。 3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次，并剔除多余无用的组织。 4.将筛网置于平皿中，脾脏置于筛网上，用弯头镊镊住，轻轻在筛网上进行碾磨，同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。 5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中，离心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。 6.加入10ml培养液，吹打混匀，取样计数。 7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中，轻轻摇晃混匀，在培养瓶上。