肾小管上皮细胞 用途与合成方法
肾小管上皮细胞是指肾小管的外面的一层细胞,是研究肾脏疾病的一项重要材料,该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法、免疫分离法。
培养步骤:
1.取材:取肾小管上皮,切成0.5~1平方厘米小块。
2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。
3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。
4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。
5.温消化:取出表皮单独处理,用剪刀剪成更小的块后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分钟。
6.用吸管轻轻反复吹打,使成细胞悬液。
7.培养液:通过80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成细胞悬液,接种入碟皿中,CO2温箱培养。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)或细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。 肾小管上皮细胞的主要作用是重新吸收。血液经过肾小球,在肾小球内滤出到肾小囊内的为原尿,里面含有水,葡萄糖,氨基酸,尿酸,尿素和电解质。但是在终尿中,并不含有氨基酸和葡萄糖,是因为原尿经过肾小管,被肾小管上皮细胞重新吸收,原尿中99%的水,全部的葡萄糖和氨基酸,部分电解质被重新吸收,尿素也被部分重新吸收,而肌酐则不被吸收。由此完成了一个重新吸收的作用。 上皮细胞样 肾组织 兔肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。 贴壁
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2021-01-07
肾小管上皮细胞的应用