人雪旺细胞

人雪旺细胞提取于人脊神经组织，原代冻存。此细胞通过对S-100,GFAP和CD90免疫荧光染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

人雪旺细胞

雪旺细胞是神经嵴的衍生物，形成了周围神经髓磷脂轴突的髓鞘。它环绕在末梢神经轴突的轴上，沿着轴突节形成一层髓磷脂髓鞘。雪旺细胞对末梢神经的发育、功能和再生起着重要作用。当轴突快死亡时，雪旺细胞环绕其周围帮助消化轴突。连续的雪旺细胞形成一个空的管道，在其尾端形成新的轴突。 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。