变性裂解液 用途与合成方法
在进行动物细胞蛋白质提取过程中,有些蛋白质比较难溶解,因此比较难以提取,需要变性裂解液进行提取,其适于不溶性细胞骨 架、膜蛋白、高度疏水蛋白,或者集聚并形成沉淀的蛋白,或者体外翻译产生的蛋白。
变性裂解液适用于SDS-PAGE、等电点聚焦和2-D 电泳。
变性裂解液于常温下运输,收到后将溶液A,溶液B放在-20°C环境中保存,保质期两年。
变性裂解液的使用注意事项:1. 溶液A若有沉淀析出,可置于30°C水浴中保温10 min,并震荡混匀,待沉淀完全溶解,冷却至室温后,即可使用。2. 裂解液中蛋白样品含有影响因子,不能用Bradford法和BCA法,但可用改良型Lowry法(C504041)或非干扰型蛋白定 量试剂盒(C503071)测定蛋白浓度。3. 在细胞裂解时,如果在进行步骤4前裂解液比较粘,可以先匀浆或超声以剪断基因组,再离心取上清。
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2020-03-06
变性裂解液的使用注意事项