0.4%台盼蓝染色液（Trypan Blue Solution）

台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不会被染成蓝色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。台盼蓝染色液（0.4%）在细胞死活鉴别方面有着独特的优势

台盼蓝（Trypan Blue）或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞的存活率。台盼蓝染色是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色而正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不会被染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。而巨噬细胞能够吞噬台盼蓝，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。另外需要注意的是，凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色只需3-5 min，操作简单。

1 称取台盼蓝粉末0.4g加入PBS溶液100ml，混悬仪混合均匀后，4度保存，有效期1年。

2 使用前取出，用0.22um滤器过滤后使用。

0.4%台盼蓝染色液可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需3-5分钟，操作简单。

1.收集细胞：用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞，悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用1000-2000rpm 离心 1 分钟，弃上清，制备单细胞悬液，并做适当稀释。

2.台盼蓝染色：细胞悬液与 0.4%台盼蓝溶液以 9:1 比例混匀（终浓度 0.04%），染色 3 分钟 (染色 3 分钟时间已经足够，但染色时间可以更长一些，但不宜超过 10 分钟)。

3.细胞计数：吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大，无光泽；活细胞不着色并保持正常形态，有光泽。通常要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数 500 个细胞。细胞存活率（%）=活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%