HTERT-HPNE 人胰腺导管上皮细胞系

hTERT-HPNE细胞是从一名52岁男性患者的胰腺中分离出来并通过含有hTERT基因的逆转录病毒表达载体（pBABEpuro）转染永生化的上皮细胞，转染后细胞端粒酶呈阳性，未发现衰老，150多次倍增后仍在增殖。hTERT-HPNE细胞具有腺泡到导管化生过程中形成的中间细胞的特性，包括其未分化表型、巢蛋白的表达和Notch信号的活性证据。hTERT-HPNE细胞暴露于丁酸钠和5-氮-2'-脱氧胞苷可诱导胰腺导管细胞的形成，其特征是p-糖蛋白（多药耐药（MDR-1））、碳酸酐酶II和细胞角蛋白7、8和19的表达。hTERT-HPNE细胞可以用于3D细胞培养、药物开发、高通量筛选实验。 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 人源（Homo sapiens） 男（Male） 胰腺（Pancreas） 贴壁生长（Adherent） 52岁（52 years） 表皮样细胞（Epithelial-like） 自发永生化细胞 正常（Normal）