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XL1-BLUE感受态细胞

XL1-BLUE感受态细胞

英文名称:EPICURIAN COLI(R) XL1-BLUE COMPETENT CELLS
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
XL1-BLUE感受态细胞 结构式

XL1-BLUE感受态细胞 用途与合成方法

XL1-BLUE感受态细胞是采用大肠杆菌XL1-Blue菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

XL1-BLUE感受态细胞

1.XL1-Blue感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

XL1-Blue菌株能保证高拷贝质粒稳定复制,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

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