吕氏碱性美蓝染色液

1、滴一小滴吕氏碱性美蓝染色液于载玻片中央，按无菌操作取少量酵母菌与其混合均匀。

2、用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌体接触，缓缓将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上。

3、放置约 3min 后，先用低倍镜后用高倍镜(不用油镜)观察酵母的形态和出芽情况，并用颜色区别死活细胞。

4、染色 0.5h 后再次观察，注意死细胞是否增加。

预期结果 ：酵母菌活细胞呈无色；酵母菌死细胞呈蓝色或淡蓝色。

1、用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。

2、滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过多会溢出，过少会产生大量气泡。

3、盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。

1. 0.1 %吕氏碱性美蓝染色液规格配料：在容器中加入少量水〔蒸馏水，自然水）按照配方称取各种药品〔依次加入〕加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。
2.溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95～97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH：用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤：滤纸或棉花进行过滤。
5.分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
6.包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。