BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)
BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞) 用途与合成方法
BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞是从一名 61 岁女性腺癌患者的胰腺组织中分离出来的细胞系,可用于癌症研究。该来源胰体癌无转移,分泌CEA、CA199黏蛋白,属于KRAS野生型胰腺癌。BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR),CFTR阳性的细胞株是Capan-1。
BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR),CFTR阳性的细胞株是Capan-1。人
胰腺 贴壁生长上皮细胞样
完全培养基:90% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
气相:95% 空气+5% CO2
温度:37℃
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
冻存液配制:90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~ 1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入梯度冻存盒,24 h后转入液氮灌储存。若无梯度冻存盒也可先放入4℃冰箱2h,接着放入-20℃冰箱4h,再置于-80℃冰箱过夜后转入液氮灌储存。
BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞 STR鉴定位点如下:
D3S1358:14,16
TH01:9
D21S11:29
D18S51:12
Penta_E:12,14
D5S818:11
D13S317:11
D7S820:10,13
D16S539:9,11
CSF1PO:13
Penta_D:14
vWA:14,18
D8S1179:13
TPOX:8
FGA:20,21
D19S433:13,16.2
D2S1338:17,19
Amelogenin:X