Cy5.5 N-羟基琥珀酰亚胺酯

英文名称:CY5.5 NHS ester
CAS号:910482-46-1
分子式:C45H48KN3O16S4
分子量:1054.22
EINECS号:
Mol文件:910482-46-1.mol
Cy5.5 N-羟基琥珀酰亚胺酯 结构式

Cy5.5 N-羟基琥珀酰亚胺酯 性质

溶解度 易溶于DMSO,DMF等有机溶剂,极易溶于水
外观 Dark blue solid
激发峰(Ex)/发射峰(Em) 678/706 nm (PBS buffer)
ε(消光系数) 211000 L⋅mol−1⋅cm−1
Φ(量子产率) 0.21

Cy5.5 N-羟基琥珀酰亚胺酯 用途与合成方法

磺化Cy5.5 (sulfo Cyanine 5.5; sulfo Cy5.5) 是一种发近红外(NIR)荧光的花青素类荧光染料。磺化Cy5.5是磺化修饰过的Cy5.5,水溶性好。磺化Cy5.5的消光系数高,荧光也很亮,并且对pH不敏感,并且由于它的荧光波长(Em:706nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以磺化Cy5.5常应用于小动物活体体内成像中。磺化Cy5.5-NHS可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸分子等。由于强水溶性加带电荷,磺化花青素标记的生物分子更稳定,不易产生疏水性聚集。
NHS活化酯 (N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester)是生物标记反应中最常用的活化基团。它活化Cy5.5分子中的羧基,让它可以和目标生物分子上的胺基(伯胺或者仲胺)反应生成稳定的酰胺键,从而把Cy5.5分子标记到生物大分子上。由于游离胺基是蛋白,抗体,多肽表面的常见官能团(来自于赖胺酸侧链),磺化Cy5.5-NHS可以和它们直接反应。核酸分子中天然不带游离胺基,只有胺基修饰过的RNA或者DNA才可以和磺化Cy5.5-NHS反应。
磺化Cy5.5-NHS活化酯的水溶性非常好,所以可以在水相的标记反应体系中直接使用,不需要有机溶剂助溶,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy5.5水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy5.5-NHS也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。如需脂溶性Cy5.5染料,可选择普通花青素(cyanine),即Cy5.5-NHS活化酯。
磺化Cy5.5-NHS标记后的产物Ex/Em是678/706nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 680,DyLight 680等。
  • NHS ester基团对湿度比较敏感,务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20分钟。
  • 使用不含氨基的缓冲体系。比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢漂白(photobleaching)。
化学性质 
外观 :    深蓝色固体
ex/em :    678/706 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :    211000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :    0.21

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英文名称:CY5.5 NHS ESTER
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