RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞
中文名称:RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞
英文名称:RKO-AS45-1 human colon cancer transgenic cell
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞 用途与合成方法
人的cDNA中编码GADD45的开放阅读框克隆到表达载体pCMV.3中,转染结肠癌细胞RKO,建立了RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞株。RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞含有稳定整合巨细胞病毒(CMV)启动子的表达载体。RKO-AS45-1细胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究。 RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞组织来源于结肠癌组织,整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子,属于上皮细胞样的贴壁生长细胞。
收到细胞后,在倒置显微镜下观察RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞的生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传三。
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2020-07-14
RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞介绍及传代