磺化Cy3活化酯

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光谱性质和Cy3类似，在荧光显微镜下发橘黄色荧光。它的荧光很亮，并且对pH不敏感，一般可以用530nm-561nm的激光束激发然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察，所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。标记后，样品背景荧光一般认为比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用来标记蛋白，抗体，多肽，核酸等各种生物分子。
NHS活化酯 （N-羟基琥珀酰亚胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester）是生物标记反应中最常用的活化基团。它活化磺化Cy3分子中的羧基，让它可以和目标生物分子上的胺基（伯胺或者仲胺）反应生成稳定的酰胺键，从而把染料分子标记到生物大分子上。由于游离胺基是蛋白，抗体，多肽表面的常见官能团（来自于赖胺酸侧链），磺化Cy3-NHS可以和它们直接反应。核酸分子中天然不带游离胺基，只有胺基修饰过的RNA或者DNA才可以和磺化Cy3-NHS反应。
磺化Cy3-NHS活化酯的水溶性极高，所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂，特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性极好，并且染料分子本身带电荷，标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集，提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3-NHS也溶于甲醇，DMSO，DMF等有机溶剂，标记反应也可以在纯有机溶剂中进行
磺化Cy3-NHS标记后的产物Ex/Em是550/566nm。和它具有相似荧光特性的染料包括TAMRA，Alexa Fluor 555，DyLight 550，BODIPY® TMR-X等。

• NHS ester基团对湿度比较敏感，务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20分钟。
• 使用不含氨基的缓冲体系。比如磷酸钠缓冲液（PBS），Hepes缓冲液，碳酸氢钠缓冲液；或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液，比如Tris，甘氨酸等。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
• 标记反应不要放在强光下，因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊。

水溶性Cy3 活性酯，CAS号：1424150-38-8（钠盐），深红色晶体，在水中很高，在极性有机溶剂（DMF，DMSO）中很好。储存条件：在-20°C中24个月。运 输：室温下长达3周。避免长时间接触光线，变干。 氨基活性sulfo-Cyanine3 NHS ester。水溶性，氨基反应性硫氰酸-NHS酯。在纯水溶液中标记蛋白质和肽，无需有机溶剂。适用于低溶解度和易变性的蛋白质。这是一种磺化、亲水、水溶性染料。没有磺化的Cyanine3 NHS ester亦可供选择。该产品是Cy3 NHS ester的衍生物。在所有应用中Sulfo-Cyanine3 NHS ester都可以替代Cy3,Alexa Fluor 546和DyLight 549。