酪蛋白酶谱MMP(3/7/10)
中文名称:酪蛋白酶谱MMP(3/7/10)
英文名称:Casein profile MMP (3/7/10)
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
酪蛋白酶谱MMP(3/7/10) 用途与合成方法
基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。迄今为止发现的MMPs 至少有28 种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellular matrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissue resorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。 基质金属蛋白酶(MMP)酪蛋白酶谱法(casein-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过酪蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定量深蓝色背景中的白色清晰的基质金属蛋白酶条带,根据分子量确定特异基质金属蛋白酶及其活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)、培养上清悬液、血清和关节滑液或脑脊液等基质金属蛋白酶-1,3,7 以及12等活性及其抑制剂的检测。 其适用于各种细胞裂解萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)、培养上清悬液、血清和关节滑液或脑脊液等基质金属蛋白酶-1,3,7 以及12等活性及其抑制剂的检测。 实验采用酶谱法(zymography)检测MMP-3、MMP-7、MMP-10活性,Zymography是一种基于SDS-PAGE电泳的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nM (10~100 pg),高于ELISA方法。通过制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶,含蛋白酶的样品在凝胶进行电泳,电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育,凝胶进行考马斯亮蓝染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-3/10的大小位置(酶谱)及活性。