腔肠素-H

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。 腔肠素H（Coelenterazine h）是天然腔肠素的去羟基衍生物，是海肾荧光素酶（Rluc）的作用底物，也是水母发光蛋白的辅因子，其发光强度比天然腔肠素高 10 倍以上，适用于报告基因分析。腔肠素H 对 Ca2+ 比它的天然复合物更敏感，可用于检测活细胞中钙离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振能量转移）研究，ELISA，HTS，以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。 1．腔肠素h最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。由此，导致不同组间的定量结果可能显得不可靠，数据可比性不高。
2．腔肠素h不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素h溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。若是必须配成液体储存液，请按照操作步骤一、腔肠素工作液制备执行。
3．体内动物实验，推荐使用我司特别开发和优化的注射用腔肠素h（#KM0096）或注射用天然腔肠素（#KM0097）。
4．发光蛋白与荧光素酶是完全不同的，比如腔肠素h适合用作海肾荧光素酶（Rluc）的底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）的底物。天然腔肠素是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。
5．商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，下图为天然腔肠素及其衍生物的光谱特性。

6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 Coelenterazine h 是 Coelenterazine 的衍生物。 Coelenterazine h 对 Ca2+ 比它的天然复合物更敏感，因此为测量 Ca2+ 浓度的微小变化提供了有价值的工具。 腔肠素-H是一种水母发光蛋白复合物，其发光强度比野生型腔肠素高 10-20 倍，是检测 Ca2+ 浓度细微变化的有力工具。