重组大鼠FGF-9

基因来源：大鼠源；表达宿主：E.Coli；表达区域：4-208； 所属家族：FGF（成纤维细胞生长因子）FGF9亚家族；家族简介：FGF家族是一个庞大的蛋白质家族，在哺乳动物中包括23种多肽，这些成员根据命名规则被命名为FGF-1到FGF-23，其中，酸性FGF（aFGF，即FGF-1）和碱性FGF（bFGF，即FGF-2）是FGF家族的原型成员，此外角质形成细胞生长因子（KGF，即FGF-7）也是该家族的重要成员之一。基于系统发育分析和生化功能等方面的研究，FGF家族可以被分为多个亚家族，其中，FGF9属于FGF9亚家族，该亚家族还包括FGF16和FGF20等成员。这些亚家族成员在结构和功能上具有一定的相似性，但也存在显著的差异。 重组大鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)重组蛋白原核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表，具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点，缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制，如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠，得到具有生物活性的蛋白的几率较小。 FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活活性，并参与多种生物过程，包括胚胎发育，细胞生长，形态发生，组织修复，肿瘤生长和侵袭。分离该蛋白质作为分泌因子，其对培养的神经胶质细胞表现出生长刺激作用。在神经系统中，这种蛋白质主要由神经元产生，可能对神经胶质细胞的发育很重要。发现该基因的小鼠同源物的表达依赖于Sonic hedgehog（Shh）信号。缺乏同源基因的小鼠显示出雄性到雌性的性别逆转表型，这表明在睾丸胚胎发生中起作用。FGF-9基因参与性别决定，肺发育和骨骼发育的模式。 FGF9，即成纤维细胞生长因子9（fibroblast growth factor 9），是成纤维细胞生长因子家族（FGFs）的重要成员，FGF9广泛分布于多种细胞和组织中，包括成骨细胞、软骨细胞、血管内皮细胞、晶状体上皮细胞，以及皮肤、肝、肾脏、胃、生殖系统、淋巴组织等。FGF9在促进细胞增殖与分化、调控器官发育、促进损伤修复、抑制细胞凋亡、维持干细胞性等方面发挥作用。FGF9能够刺激多种细胞的增殖与分化，包括成纤维细胞、上皮细胞、神经细胞等，在体外培养的成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等体细胞，FGF9都有较强的增殖促进作用。 重组大鼠FGF-9的制备1.建立大鼠鼠FGF9的原核表达体系,获得纯化的FGF9重组蛋白,采用PCR技术扩增FGF9,并将其克隆入原核表达载体pET30a(+)中2.经测序验证后将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达3.采用亲和层析技术进行目的蛋白的纯化4.并用Western blotting进行了免疫原性验证。