NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞

NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞是1962年Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的；该细胞的生长受接触性抑制，汇合状态的单层细胞密度为40000个细胞/平方厘米；检测结果显示该细胞鼠痘病毒阴性；在塑料瓶中生长较好，在某些玻璃表面上可能状态不佳；细胞生长饱和时其密度可以达到约50000 cells/cm2。

NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。